ICS07.100.30CCSX04中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5364.6—2021出口食品中致病菌检测方法微滴式数字PCR法第6部分:单核细胞增生李斯特氏菌DropletdigitalPCRmethodfordetectionofpathogensinexportfood-Part6:Listeriamonocytogenes2021-11-22发布2022-06-01实施中华人民共和国海关总署发布以正式出版文本为准以正式出版文本为准前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。SN/T5364—2021《出口食品中致病菌检测方法微滴式数字PCR法》共分为8个部分:第1部分:副溶血性弧菌;第2部分:霍乱弧菌;第3部分:溶藻弧菌;第4部分:创伤弧菌;第5部分:金黄色葡萄球菌;第6部分:单核细胞增生李斯特氏菌;第7部分:产志贺毒素大肠埃希氏菌;第8部分:克罗诺杆菌属(阪崎肠杆菌)。本文件为SN/T5364—2021的第6部分。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中国海关科学技术研究中心。本文件主要起草人:马丹、李丹、魏海燕、张西萌、徐蕾蕊、魏咏新、付溥博、曾静。ⅠSN/T5364.6—2021以正式出版文本为准以正式出版文本为准出口食品中致病菌检测方法微滴式数字PCR法第6部分:单核细胞增生李斯特氏菌1范围本文件规定了食品中单核细胞增生李斯特氏菌的微滴式数字PCR检测方法。本文件适用于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的快速定性检测。本文件的检出限为1CFU/25g~5CFU/25g(或1CFU/25mL~5CFU/5mL)。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB4789.30食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27403—2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4缩略语下列缩略语适用于本文件。DNA(deoxyribonuleicacid):脱氧核糖核酸。ddPCR(dropletdigitalpolymerasechainreaction):微滴式数字PCR。PCR(polymerasechainreaction):聚合酶链式反应。5方法原理针对单核细胞增生李斯特氏菌溶血素(hly)基因片段设计引物、探针,将一定浓度的引物、探针与模板DNA及数字PCR反应预混液混合,配成PCR反应体系。将该数字PCR体系分布到10000~20000个微滴中,使大部分微...