中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5334.7—2020转基因植物产品的数字PCR检测方法第7部分：转基因苜蓿ProtocolofdigitalPCRforquantitativelydetectinggeneticallymodifiedplantsandtheirderivedproducts—Part7:Geneticallymodifiedalfalfa2020-12-30发布2021-07-01实施ICS65.020.01CCSB16中华人民共和国海关总署发布SN/T5334.7—2020前言SN/T5334—2020《转基因植物产品的数字PCR检测方法》分为8个部分：——第1部分：通用要求及定义；——第2部分：转基因大豆；——第3部分：转基因玉米；——第4部分：转基因油菜；——第5部分：转基因棉花；——第6部分：转基因马铃薯；——第7部分：转基因苜蓿；——第8部分：转基因甜菜。本部分为SN/T5334—2020的第7部分。本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国广州海关检验检疫技术中心。本文件主要起草人：刘津、付伟、高东微、刘二龙、朱水芳、董洁、关丽军、谢力。I1SN/T5334.7—2020转基因植物产品的数字PCR检测方法第7部分：转基因苜蓿1范围本文件规定了进、出口苜蓿中转基因品系特异性的数字PCR（dPCR）定量检测方法。本文件适用于苜蓿种子和苜蓿草中转基因苜蓿J101、J163、KK179品系特异性成分的定量检测。本文件的定量检测低限为7.0拷贝/μL，定性检测低限为1.4拷贝/μL。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T5334.1转基因产品定量检测数字PCR方法第1部分：通用要求及定义3术语和定义SN/T5334.1界定的术语与定义适用于本文件。4方法原理见SN/T5334.1。5设备及试剂5.1内源基因和外源基因：内标准基因为乙酰辅酶A羧化酶基因（ACC）；外源序列为品系J101、J163和KK179外源基因插入位点5’端跨界序列。苜蓿中转基因品系特异性dPCR定量检测所用引物探针序列参见附录A。5.2其他设备及试剂要求见SN/T5334.1的规定。6方法操作步骤6.1一般性操作步骤一般性操作步骤见SN/T5334.1的规定。6.2数字PCR反应体系按照表1配制数字PCR的最终反应体系。2SN/T5334.7—2020表1数字PCRa实验反应体系试剂b储备液浓度体积终浓度MasterMix2×10μL1×内...
