中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4920—2017代替SN/T1017.2—2001ICS65.020.30B41猪丹毒检疫技术规范Quarantineprotocolforswineerysipelas2017-11-07发布2018-06-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布SN/T4920—2017I前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出入境检验检疫局。本标准主要起草人:张强、杨春华、林颖峥、花群义、李树清、熊炜、王艳、王昱、王巧全、李健。1SN/T4920—2017猪丹毒检疫技术规范1范围本标准规定了猪红斑丹毒丝菌的分离鉴定、SYBRGreenⅠ荧光PCR试验和猪丹毒血清培养凝集试验的技术规范。本标准适用于猪丹毒的诊断及流行病学调查。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件。其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GR/T6682分析实验室用水规格和分析方法3缩略语下列缩略语适用于本文件。ER:红斑丹毒丝菌(erysipethrixrhusiopathiae)TSA:胰胨大豆琼脂(trypitcsoyagar)TSB:胰胨大豆肉汤(trypticsoybroth)PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)4临床症状见附录A。5病原分离鉴定5.1生物安全猪红斑丹毒丝菌是人畜共患病原菌,样品的处理、细菌学检查应在生物安全二级实验室操作;废弃物的处理应符合生物安全的管理规定。5.2样品采集无菌采集发病猪的耳静脉血和切开疹块挤压出的血液或渗出液。死亡病例、急性病例可采集被检猪的心血、肝、脾、肾、淋巴结等脏器;亚急性疹块病例可采集皮肤疹块病料;慢性病例可采集关节液和心内膜的增生物。采集样品如不能及时处理,可放置4℃冰箱冷藏。5.3细菌学检查制成的血涂片或脏器组织抹片,用革兰氏染色,镜检。红斑丹毒丝菌是一种纤细的革兰氏阳性小杆菌,菌体平直或稍弯。在血涂片上,可见到散在于红细胞之间的菌体,有的出现丛集,还能见到被2SN/T4920—2017白细胞吞噬的现象。在脏器的抹片中,菌体常单独、成对或丛状排列。在瓣膜增生的显微组织和关节液涂片中,见到的红斑丹毒丝菌呈长丝状,构成丝状菌团。5.4分离培养将病料接种于pH值7.4~7.8含有5%健康马血清的马丁肉汤培养液(见B.1)、马丁琼脂培养基(见B.2)或TSB培养液(...