GB/T16286-1996前言食品中蔗糖的测定方法,一般采用盐酸水解法。由于盐酸水解蔗糖过程中,还有其他糖类被水解为还原糖,导致测定结果偏高。本标准采用的酶一比色法是在检索了近20年148篇国外文献的基础上,经过反复实验、验证而制定的。由于酶法具有高度的专一性(R-果糖昔酶只能催化蔗糖转化为葡萄糖和果糖),灵敏度高,操作简便,因此测定结果准确。蔗糖酶解后的产物—葡萄塘的测定方法,与GB/T16285-1996保持一致。本标准的附录A是标准的附录。本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位:中国农垦北方食品监测中心。本标准经全国食品工业标准化技术委员会秘书处审核。本标准主要起草人:张宗城、刘宁、郝I中华人民共和国国家标准食品中蔗糖的测定方法酶一比色法Gs/T16286一1996Methodfordetermin.tionofsucroseinfood-Enzyme-colorimetrkmethod1范围本标准规定了用酶一比色法测定食品中蔗糖的方法。本标准适用于各类食品中蔗糖的测定。本标准最低检出限量为。04Kg(蔗糖/mL(试液)。2原理在件果糖昔酶(各FS)催化下,蔗糖被酶解为葡萄糖和果糖。葡萄糖氧化酶(GOD)在有氧条件下,催化各D-葡萄糖(葡萄糖水溶液状态)氧化,生成D-葡萄糖酸-s-内酷和过氧化氢。受过氧化物酶(POD)催化,过氧化氢与4-氨基安替比林和苯酚生成红色酿亚胺。在波长505nm处测定酿亚胺的吸光度,计算食品中蔗糖的含量。C,2H22011+H20士月三C,H,206(G)+C6H,A(F)coH:0。(G)+0。tC,H,A(G)+OZ-塑址,H,o06+1-1202H202+C,H,OH+CHN,O坚聚c6H,NO+H203试剂31组合试剂盒1号瓶:内含详果糖普酶(fructosidase)400U(活力单位)、柠檬酸、柠檬酸三钠;2号瓶:内含。2mol/L磷酸盐缓冲液(pH=7.6)200mL,其中含4-A基安替比林0.00154mol/L;3号瓶:内含。.022mol/L苯酚溶液200ml.;4号瓶:内含葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)S00U(活力单位)、过氧化物酶(辣根,peroxidase)2000U活力单位)。1,2,3,4号瓶须在4℃左右保存。3.2酶试剂溶液3.2.1将1号瓶中的物质用重蒸馏水溶解,使其体积为66mL,轻轻摇动(勿剧烈摇动),使酶完全溶解。此溶液即为卜果糖普酶试剂,其中柠檬酸(缓冲溶液)浓度为0.1mol,/L,PH=4.6。在4℃左右保存,有效期一个月。将2号瓶与3号瓶中的溶液充分混合。将4号瓶中的酶溶解在3.2.2混合液中,轻轻播动(勿剧烈摇动),使酶完全溶解,即为葡萄糖氧川3.23化酶一过氧化物酶试剂溶液。在4℃左右保存.有效期一个月。国家技术监督局1996一04-10批准199&一12一01实施GB/T16286一19963...