中华人民共和国国家标准GB4789.38-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数中华人民共和国卫生部发布2012-05-17发布2012-07-17实施GB4789.38-2012I前言本标准代替GB/T4789.38-2008《食品卫生微生物学检验大肠杆菌计数》。本标准与GB/T4789.38-2008相比,主要变化如下:——修改了标准的中文名称;——修改了培养基和试剂;——将“第二法大肠杆菌VRB-MUG平板计数法”改为“大肠埃希氏菌平板计数法(第二法)”;——删除了“第三法大肠杆菌PetrifilmTM测试片计数法”;——修改了附录A。GB4789.38-20121食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数1范围本标准规定了食品中大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)计数的方法。本标准适用于食品中大肠埃希氏菌的计数,其中大肠埃希氏菌平板计数法(第二法)不适用于贝类产品。2术语和定义2.1大肠埃希氏菌Escherichiacoli大肠杆菌广泛存在于人和温血动物的肠道中,能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气,IMViC(靛基质、甲基红、VP试验、柠檬酸盐)生化试验为++--或-+--的革兰氏阴性杆菌。以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生状况,推断食品中肠道致病菌污染的可能性。2.2最可能数基于泊松分布的一种间接计数方法,简称为MPN。3设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:a)恒温培养箱:36℃±1℃;b)冰箱:2℃~5℃;c)恒温水浴箱:44.5℃±0.2℃;d)天平:感量为0.1g;c)均质器;d)振荡器;e)无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头;f)无菌锥形瓶:容量500mL;g)无菌培养皿:直径90mm;h)pH计或pH比色管或精密pH试纸;i)菌落计数器;j)紫外灯:波长360nm~366nm,功率≤6W。4培养基和试剂4.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤:见附录A中A.1。4.2EC肉汤(E.colibroth):见附录A中A.2。4.3蛋白胨水:见附录A中A.3。GB4789.38-201224.4缓冲葡萄糖蛋白胨水[甲基红(MR)和V-P试验用]:见附录A中A.4。4.5西蒙氏柠檬酸盐培养基:见附录A中A.5。4.6磷酸盐缓冲液:见附录A中A.6。4.7伊红美蓝(EMB)琼脂:见附录A中A.7。4.8营养琼脂斜面:见附录A中A.8。4.9结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA):见附录A中A.9。4.10结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂(VRBA-MUG):见附录A中A.10。4.11革兰氏染色液:见附录A中A.11。4.12Kovacs靛基质试剂:见附录A中A.12。4.13无菌1mol/LNaOH:见附录A中A.13。4.14无菌1mol...