中华人民共和国国家标准GB4789.15—2010食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数NationalfoodsafetystandardFoodmicrobiologicalexamination:Enumerationofmouldsandyeasts中华人民共和国卫生部发布2010-03-26发布2010-06-01实施GB4789.15—2010I前言本标准自实施之日起代替GB/T4789.15-2003《食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数》。本标准与GB/T4789.15-2003相比,主要修改如下:——修改了范围;——修改了检验程序和操作步骤;——修改了培养基和试剂;——修改了设备和材料;——修改了附录。本标准的附录A为规范性附录,附录B为资料性附录。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:——GB4789.15-1984、GB4789.15-1994、GB/T4789.15-2003。GB4789.15—20101食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数1范围本标准规定了食品中霉菌和酵母菌(mouldsandyeasts)的计数方法。本标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。2设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:2.1冰箱:2℃~5℃。2.2恒温培养箱:28℃±1℃。2.3均质器。2.4恒温振荡器。2.5显微镜:10×~100×。2.6电子天平:感量0.1g。2.7无菌锥形瓶:容量500mL、250mL。2.8无菌广口瓶:500mL。2.9无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)。2.10无菌平皿:直径90mm。2.11无菌试管:10mm×75mm。2.12无菌牛皮纸袋、塑料袋。3培养基和试剂3.1马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基:见附录A中A.1。3.2孟加拉红培养基:见附录A中A.2。4检验程序霉菌和酵母计数的检验程序见图1。GB4789.15—20102图1霉菌和酵母计数的检验程序5操作步骤5.1样品的稀释5.1.1固体和半固体样品:称取25g样品至盛有225mL灭菌蒸馏水的锥形瓶中,充分振摇,即为1:10稀释液。或放入盛有225mL无菌蒸馏水的均质袋中,用拍击式均质器拍打2min,制成1:10的样品匀液。5.1.2液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶(可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。5.1.3取1mL1:10稀释液注入含有9mL无菌水的试管中,另换一支1mL无菌吸管反复吹吸,此液为1:100稀释液。5.1.4按5.1.3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管。5.1.5根据对样品污染状况的估计,选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释的同时,每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。同时分别取1mL...