实验(shíyàn)生物组织中糖类脂肪和蛋白质鉴定第一页,共二十三页。思考题:1、糖类、脂肪、蛋白质鉴定的实验原理2、常见的还原糖有哪些?取材的要求3、斐林试剂的组成,使用时的注意事项4、双缩脲试剂的组成,使用时注意事项5、斐林试剂和双缩脲试剂的比较(bǐjiào)6、脂肪鉴定中酒精的用法和作用7、脂肪鉴定中能否直接观察颜色?借助什么来观察?8、如何鉴定淀粉,颜色反应如何第二页,共二十三页。1.实验原理:化学试剂+有机化合物→特定(tèdìng)的颜色(1)还原糖+斐林试剂水浴加热砖红色沉淀(2)脂肪(zhīfáng)+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色(3)蛋白质+双缩脲试剂→紫色第三页,共二十三页。2、常见的还原糖有哪些?取材的要求还原糖:可被氧化充当还原剂的糖。(常见的有:葡萄糖、果糖(guǒtáng)、麦芽糖、乳糖、半乳糖)注意:蔗糖不是还原糖3、斐林试剂的组成,使用时注意事项斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液•使用注意事项:等量混合,现配现用(NaOH+CuSO4)第四页,共二十三页。1.点拨:还原糖+斐林试剂砖红色沉淀可溶性还原糖与斐林试剂发生(fāshēng)作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。(放在盛有50-65℃温水的大烧杯)水浴(shuǐyù)加热颜色(yánsè)变化:浅蓝色棕色砖红色第五页,共二十三页。1步骤:样液制备:(取材5g,加入石英砂和5ml水)(1)取样(qǔyàng)液2ml于试管中(2)加入新配制的斐林试剂1ml(甲液和乙液等量混合均匀后再加入)盛有50-65℃温水的大烧杯)(3)水浴加热2min左右((4)观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)第六页,共二十三页。注意事项:(1)材料的选取:还原糖含量(hánliàng)高,白色或近于白色,如苹果》梨》白萝卜。思考:西瓜、甘蔗、甜菜可以吗?为什么?(2)试剂:斐林试剂(等量混合、现配现用)甲液:0.1g/mL的NaOH溶液乙液:0.05g/ml的CuSO4溶液第七页,共二十三页。4、双缩脲试剂组成(zǔchén)ɡ,使用时注意事项第八页,共二十三页。双缩脲试剂(shìjì)组成:A液:0.1g/mL的NaOH溶液B液:0.01g/mL的CuSO4溶液使用(shǐyòng)注意事项:先加A液1mL于样液中,再加B液4滴于样液中(1)蛋白质+双缩脲试剂(shìjì)→紫色第九页,共二十三页。2步骤:(1)试管中加样液2mL(2)加双缩脲试剂A液1mL(造成碱性环境),摇匀(3)加双缩脲试剂B液4滴,摇匀(4)观察颜色变化(紫色)注:①样液浓度(nóngdù)不宜过高,以免实验后黏住试管壁,洗不干净。②B液不能...