�����������犌犅５００９．２８５—２０２２��������������犅１２���２０２２０６３０��２０２２１２３０������������������������������犌犅５００９．２８５—２０２２１前言本标准代替ＧＢ５４１３．１４—２０１０《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素Ｂ１２的测定》。本标准与ＧＢ５４１３．１４—２０１０相比，主要变化如下：———增加了第一法液相色谱法；———增加了第二法液相色谱质谱法；———删除了规范性引用文件；———修改了原微生物法为第三法。犌犅５００９．２８５—２０２２１食品安全国家标准食品中维生素犅１２的测定１范围本标准规定了食品中维生素Ｂ１２的测定方法。第一法液相色谱法适用于婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品中维生素Ｂ１２的测定。第二法液相色谱质谱法适用于婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品、即食谷物、烘焙食品、果冻、饮料中维生素Ｂ１２的测定。第三法微生物法适用于婴幼儿食品、乳及乳制品中维生素Ｂ１２的测定。第一法液相色谱法２原理试样经酶解后，用氰化钾（或氰化钠）溶液将钴胺素异构体（羟钴胺素、甲钴胺素和５脱氧腺苷钴胺素等）转化为氰钴胺素。样液通过免疫亲和柱净化、浓缩后，反相液相色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量。３试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。３．１试剂３．１．１无水乙酸钠（ＣＨ３ＣＯＯＮａ）。３．１．２乙酸（ＣＨ３ＣＯＯＨ）。３．１．３甲醇（ＣＨ３ＯＨ）：色谱级。３．１．４乙腈（ＣＨ３ＣＮ）：色谱级。３．１．５三氟乙酸（ＣＦ３ＣＯＯＨ）：色谱级。３．１．６氰化钾或氰化钠（ＫＣＮ／ＮａＣＮ）。３．１．７胃蛋白酶（ＣＡＳ号：９００１７５６，活力≥４００Ｕ／ｍｇ）。３．１．８淀粉酶（活力≥５０Ｕ／ｍｇ）。３．１．９乙醇（Ｃ２Ｈ６Ｏ）。３．２试剂配制３．２．１乙醇溶液（２５％）：量取２５０ｍＬ乙醇，加水稀释至１０００ｍＬ，混匀。３．２．２乙酸钠缓冲液（０．２５ｍｏｌ／Ｌ）：称取２０．５ｇ无水乙酸钠，用９５０ｍＬ水溶解并用乙酸调ｐＨ至４．０±０．１，用水稀释至１０００ｍＬ。犌犅５００９．２８５—２０２２２３．２．３氰化钾（或氰化钠）溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）：称取１．０ｇ氰化钾（或氰化钠）固体，加适量水溶解，并用水稀释至１００ｍＬ。注：氰化钾（或氰化...
