第29卷第5期2023年3月中国实验方剂学杂志ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeVol.29，No.5Mar.，2023归芪白术方联合奥沙利铂通过调节VIP/cAMP/PKA/AQPs信号通路保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障董焕成1，2，苏韫1，2，3，4*，龚红霞1，2，3，4，曹旺杰1，2，3，和建政1，2，3，刘永琦1，2，3，张晗1，2，曾元丁1，2，李从艺1，2，康倩1，2（1.甘肃中医药大学基础医学院，兰州730000；2.甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室，兰州730000；3.甘肃省中医药防治慢性疾病重点实验室，兰州730000；4.国家卫生健康委胃肠肿瘤诊治重点实验室，甘肃省人民医院，兰州730000）［摘要］目的：探讨归芪白术方联合奥沙利铂通过血管活性肠肽（VIP）/环磷酸腺苷（cAMP）/蛋白激酶A（PKA）信号通路调控下游水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白4（AQP4）从而保护胃癌荷瘤小鼠肠道屏障的作用。方法：将密度为1×107个/mL的胃癌细胞株MFC制成细胞悬液，经荷瘤小鼠右腋下接种细胞悬液0.2mL，构建胃癌荷瘤小鼠模型，造模成功后将小鼠随机分为5组，模型组、奥沙利铂组（10mg·kg-1）、奥沙利铂加归芪白术方高、中、低剂量组（17.68、8.84、4.42g·kg-1），每组10只，另外余10只作为空白组。各组小鼠经灌胃或腹腔注射中药、奥沙利铂或生理盐水，治疗14d。末次给药后，次日眼球取血分离血清并取其结肠样本。苏木素-伊红（HE）染色观察组织形态的变化。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中D-乳酸（D-LA）、二胺氧化酶（DAO）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-timePCR）及蛋白免疫印迹法（Westernblot）分别检测各组小鼠结肠组织中VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4mRNA及蛋白的表达。结果：与正常组比较，模型组黏膜下层水肿，黏膜层中肠腺排列紊乱，杯状细胞缺失，可见大量炎性细胞浸润及绒毛脱落的现象。而各给药组均有不同程度的改善；与正常组比较，模型组血清中DAO和D-LA水平均显著上升（P<0.01），与模型组比较，联合用药高剂量组DAO和D-LA水平及联合用药中剂量组D-LA水平均有所下降（P<0.05，P<0.01），与奥沙利铂组比较，联合用药高、中剂量组D-LA水平有所下降（P<0.05），其余组DAO和D-LA表达水平也有所下降，但差异无统计学意义；与正常组比较，模型组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，各给药组小鼠的VIP、cAMP、PKA、AQP3和AQP4mRNA及蛋白表达水平均有所升高，...
