39(1)111-121中国生物防治学报ChineseJournalofBiologicalControl2023年2月收稿日期：2021-12-22基金项目：国家自然科学基金（31672026，U21A20223，32011530117）；浙江省重点研发项目（2019C02015，2022C02047）；浙江省基础公益研究计划项目（LY20C140005）；中国计量大学科研标志性发展专项（2020YW27）作者简介：矫启启，硕士研究生，E-mail：919727417@qq.com。*通信作者，郝培应，博士，教授，E-mail：haopeiy@163.com；俞晓平，博士，研究员，E-mail：yuxiaoping19630306@163.com。DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2022.01.011褐飞虱自噬相关基因NlATG4的表达与功能矫启启，吴建艮，冯娅琳，俞飞飞，陈桐桐，郑园园，郝培应*，俞晓平*（中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室，杭州310018）摘要：ATG4是一种半胱氨酸蛋白酶，负责ATG8蛋白羧基末端的切割，在自噬体形成过程中发挥重要作用。本研究克隆得到褐飞虱ATG4基因（NlATG4）的cDNA全长序列（GenBank登录号:MF062502.1）。RT-qPCR分析结果表明，NlATG4基因在褐飞虱的若虫和成虫时期均有表达，1～2龄若虫的表达量最高，在其他发育阶段的表达量稍低。RNAi结果显示，在dsRNA注射后的第4d，靶标基因NlATG4的表达量显著下降（仅为dsGFP对照组的22%），同时，NlATG4的RNA干扰导致虫体ATP含量显著降低，仅为1.0μmol/(L·mg蛋白-1)，为对照组的25%；在注射后的第6d，dsNlATG4处理组的褐飞虱存活率出现显著降低，其脂肪体组织变得松散，大型脂滴（直径≥5.0μm）数量增多，类酵母共生菌周围泡状结构的界限基本消失；在注射后的第8d，dsNlATG4处理的褐飞虱的存活率下降为36.7%，比dsGFP对照组的存活率下降53.3%。本研究表明靶向NlATG4基因的RNA干扰会破坏褐飞虱脂肪体的结构完整性和类酵母共生菌的微环境，影响脂类物质代谢和ATP含量，并导致褐飞虱存活率降低。因此，NlATG4基因在褐飞虱正常生长发育中发挥重要作用，在褐飞虱防治中具有一定的潜力。关键词：褐飞虱；NlATG4基因；RNAi；脂肪体中图分类号：Q96文献标识码：A文章编号：1005-9261(2023)01-0111-11ExpressionandFunctionAnalysisofAutophagy-relatedGeneNlATG4inBrownPlanthopper,Nilaparvatalugens(Hemiptera:Delphacidae)JIAOQiqi,WUJiangen,FENGYalin,YUFeifei,CHENTongtong,ZHENGYuanyuan,HAOPeiying*,YUXiaoping*(ZhejiangProvincialKeyLaboratoryofBiometrologyandInspection&Quarantine/Collegeof...
