西北农业学报2023,32(3):479-487ActaAgriculturaeBoreali-occidentalisSinicadoi:10.7606/j.issn.1004-1389.2023.03.016https://doi.org/10.7606/j.issn.1004-1389.2023.03.016枸杞内生真菌NQ8GⅡ4定殖促生作用研究收稿日期:2021-10-04修回日期:2021-11-15基金项目:国家自然科学基金(31460484);宁夏回族自治区重点研发项目(2019BBF02013)。第一作者:李金,男,硕士研究生,从事生物防治与菌物资源利用研究。E-mail:2421533668@qq.com通信作者:顾沛雯,女,教授,博士生导师,研究方向为植物病理学及植物内生菌。E-mail:gupeiwen2019@nxu.edu.cn李金,闫思远,陈思杰,顾沛雯(宁夏大学农学院,银川750021)摘要为进一步明确内生生防菌NQ8GⅡ4在宿主和非宿主植物中的定殖能力和促生作用,采用生物学方法测定野生型NQ8GⅡ4菌株的促生潜力;利用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NQ8GⅡ4-GFP菌株,对枸杞、番茄、小麦、西葫芦、生菜和芹菜等6种植物进行灌根处理,利用激光扫描共聚焦显微镜观测NQ8GⅡ4-GFP菌株在宿主和非宿主植物中的定殖情况,同时检测不同接种浓度对枸杞苗生长的影响。结果表明,野生型NQ8GⅡ4菌株在5d时赤霉素浓度可达16.6μg/mL,并具有一定解磷、产铁载体、纤维素酶和蛋白酶的能力。NQ8GⅡ4-GFP菌株能定殖于枸杞、番茄和小麦的根部,不能定殖于芹菜、生菜和西葫芦。不同植物定殖率有明显差异,在宿主植物枸杞根部定殖率最高,为93.9%,在非宿主植物番茄根部定殖率为91.84%,而在小麦根部定殖率仅为21.43%。不同接种浓度下对枸杞苗生长指标影响不同,其中以105~106CFU/mL孢子液灌根,对枸杞苗促生作用显著,在农业上具有良好的应用前景。关键词内生真菌NQ8GⅡ4;绿色荧光蛋白;定殖;促生作用植物内生真菌是指生活史的全部或某一阶段定殖于植物体内,但对宿主植物不造成明显病害症状的一类真菌[1]。有益内生真菌的定殖能够促进宿主植物生长,增强宿主抗逆抗病能力,而内生真菌发挥促生和防病作用的前提是与植物建立良好共生关系[2-3]。目前,用于检测内生真菌在植物体内定殖的方法有基因标记法[4]、抗生素标记法[5]、同位素示踪法[6]、核酸探针法[7]和免疫学等方法[8]。报告基因技术的发展为研究内生真菌在植物中定殖和互作关系提供了极大的便利。绿色荧光蛋白(Greenfluorescenceprotein,GFP)易于检测、对细胞无毒害、表达稳定,在多种生物细胞中均可表达,使其成为广泛应用的分子标记之一[9]。丁婷等[10]利用GFP标记,观察发现杜仲内生真菌DZJ07-6可在小麦根和茎组织的细胞间隙和...
