收稿日期:2022－09－06;修订日期:2022－12－13作者简介:刘珍妮(1994—)，女，畜牧师，从事动物营养与动物疫病研究。基金项目:2022年赣州市赣南科学院科技计划专项(赣市科院字［2022］20号);2019年赣州市科技计划项目(赣市科发［2019］27号);江西省家禽产业技术体系(JXAＲS－09);2021年赣州市科技计划项目(赣市科发［2021］24号)。*通信作者:雷小文(1983—)，男，硕士，副研究员。E－mail:343224896@qq．com。第41卷第1期2023年2月江西科学JIANGXISCIENCEVol．41No．1Feb．2023doi:10．13990/j．issn1001－3679．2023．01．008番鸭HSP70的SYBＲGreenI实时荧光定量PCＲ检测方法的建立及其初步应用刘珍妮1，陈强2，钟尧禹2，雷小文1*，吴辉生3，胡汝琴3，邱静芸1，史湖敏1，钟云平1(1．赣州市畜牧水产研究所，341401，江西，赣州;2．赣州市南康区农业技术推广中心，341400，江西，赣州;3．赣州职业技术学院，341099，江西，赣州)摘要:旨在建立一种高灵敏度的番鸭热休克蛋白70(Heatshock70，HSP70)基因的荧光定量PCＲ检测技术，并以此技术检测番鸭在热应激前后HSP70基因转录表达量的变化情况。由NCBI上HSP70基因保守序列来设计特异性引物，将试验番鸭的mＲNA反转为cDNA，检验其重复性、特异性和灵敏度，利用建立的方法对热应激条件下番鸭体内各组织基因的转录变化进行检测。结果表明:本研究构建的SYBＲGreenI实时荧光定量PCＲ检测方法所用的引物特异性较好，与1．35×102～1．35×107copies/μL的PCＲ产物之间存在着良好线性关系，方程为y=－1．96x+18．2，相关系数为－0．983，扩增效率为226．55%;熔解温度Tm值为(84．0±1．0)℃，曲线呈特异性单一峰;该方法的灵敏度为1．35×102copies/μL。与正常条件相比，热应激条件下番鸭血液、心脏、肝脏、脾脏、肾脏和肌肉的HSP70基因表达水平显著升高(P＜0．05)。该研究成功构建了番鸭HSP70基因荧光定量PCＲ检测新技术，并对长期热应激条件下，番鸭体内HSP70基因的转录水平进行了深入研究，为后续试验的开展提供了重要的数据基础和技术条件。关键词:番鸭;热休克蛋白70;实时荧光定量PCＲ中图分类号:S834文献标识码:A文章编号:1001－3679(2023)01－039－06EstablishmentandPreliminaryApplicationofSYBＲGreenIＲeal－TimePCＲAssayforDetectionofHSP70inMuscovyDuckLIUZhenni1，CHENQiang2，ZHONGYaoyu2，LEIXiaowen1*WUHuisheng3，HUＲuqin3，QIUJingyun1，SHIHumin1，ZHONGYunping1(1．GanzhouAnimalHusbandr...
