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发根农杆菌介导的细茎柱花草毛状根转化体系的建立_赵兴坤.pdfVIP免费

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第31卷第2期Vol.31No.2草地学报ACTAAGRESTIASINICA2023年2月Feb.2023doi:10.11733/j.issn.1007-0435.2023.02.032发根农杆菌介导的细茎柱花草毛状根转化体系的建立赵兴坤1,孙昊1,杨丽云1,罗丽娟1*,刘攀道2*(1.海南大学热带作物学院,海南海口570228;2.中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所,农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室,海南海口571101)摘要:细茎柱花草(Stylosanthesgracilis)是圭亚那柱花草(S.guianensis)的野生近缘种,具有茎秆直立、种子落粒性低、抗旱能力较强等特点。为开发一种高效的细茎柱花草毛状根转化体系,本研究以细茎柱花草子叶节为外植体及4个发根农杆菌为供试菌种,探索菌液浓度、侵染时间、共培养时间对毛状根转化效率的影响。结果表明MSU440为诱导毛状根发生的最优菌株,诱导率为88.3%。其中,该菌株诱导毛状根产生的最佳条件为菌液浓度OD600=0.3、侵染时间为15min、共培养4d,转化效率达34.72%。同时,获得的转基因材料通过聚合酶链式反应(PCR)和蛋白质免疫印迹(Westernblot)分子鉴定方式,证实了外源基因已整合到细茎柱花草毛状根的基因组中。因此,本研究成功建立了一种细茎柱花草的毛状根转基因体系。关键词:细茎柱花草;子叶节;发根农杆菌;转基因;毛状根中图分类号:Q943.2文献标识码:A文章编号:1007-0435(2023)02-0581-06EstablishmentoftheGeneticTransformationSystemofStylosanthesgracilismediatedwithAgrobacteriumrhizogenesZHAOXing-kun1,SUNHao1,YANGLi-yun1,LUOLi-juan1*,LIUPan-dao2*(1.CollegeofTropicalCrops,HainanUniversity,Haikou,HainanProvince570228,China;2.TropicalCropGeneticResourcesInstitute,ChineseAcademyofTropicalAgricultureSciences/KeyLaboratory...

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