doi：10.19928/j.cnki.1000-6346.2023.5041辣椒番茄斑萎病毒（TSWV）分子鉴定及环介导等温扩增（LAMP）检测技术韦建明1黄鑫1耿坤2李文彪3冯文卓1李云洲1*（1贵州大学农学院植物病理教研室，贵州贵阳550025；2贵州省贵阳市蔬菜技术推广站，贵州贵阳550081；3贵阳市农业农村局，贵州贵阳550081）摘要：为明确侵染贵州辣椒的番茄斑萎病毒（Tomatospottedwiltvirus，TSWV）株系，并建立TSWV环介导等温扩增（LAMP）等快速检测技术，从贵州省辣椒主产区采集疑似感染TSWV的辣椒样本12份和西花蓟马样本10份，并应用RT-PCR、LAMP检测技术，以及基于TSWV-N基因系统发育树构建进行研究。通过分子诊断和测序结果分析，确认疑似感染辣椒样本被TSWV侵染。此外，贵州息烽地区辣椒TSWV病毒病原分离物与贵州番茄TSWV-N分离物相似度最高，为99%。基于这些发现，成功建立了针对辣椒作物和传播媒介西花蓟马的TSWV快速检测系统，为贵州辣椒病毒病害的监测和防控提供有力支持。关键词：番茄斑萎病毒；西花蓟马；LAMP检测；分子诊断前，该病毒已经遍布非洲、美洲、亚洲、澳大利亚和欧洲等地区，涉及单子叶和双子叶植物1000余种，在世界十大植物病毒中排名第二（Rybicki，2015）。近年来，分子诊断方法的发展催生了多种先进工具。例如，逆转录酶聚合酶链反应（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR）、环介导等温扩增（Loop-mediatedisothermalamplification，LAMP）（杨再俊等，2021；Rizzoetal.，2021）。LAMP检测技术主要原理是等温基因扩增及实时浊度检测。它能够通过软件对图像数据进行实时观察与分析，同时也可以通过肉眼观察颜色的深浅来判断底物中的病原物的数量和存在情况。LAMP检测技术具有灵敏度高、特异性好、扩增时间短、操作简单等优点，目前，该技术逐渐发展成熟，已应用于医学、农业和食品工业等不同领域（王道等，2021；罗丽婷等，2022）。病毒病具有潜隐性等特点，一旦发病，防治非常困难，快速简便明确农作物早期病毒病原，对预防病毒的大面积扩散至关重要。目前，LAMP检测病毒技术已经应用于多种植物病毒，如番茄褐色皱果病毒（Tomatobrownrugosefruitvirus，ToBRFV）（Rizzo韦建明，硕士研究生，专业方向：植物病理学，E-mail：weijianming1999@126.com*通信作者（Correspondingauthor）：李云洲，男，副教授，硕士生导师，专业方向：植物病理学和蔬菜抗病抗逆，E-mail：liyunzhou2007@126.com，yzli1@gzu.edu.cn收稿日期：2022-06-2...
