·130·医药前沿2024年5月第14卷第13期综合医学3月—2023年5月30份通过冰冻切片快速免疫组化技术诊断为恶性肿瘤的标本，包括11份肺，3份甲状腺，6份乳腺及前哨淋巴结，1份舌，3份子宫，1份颌下腺，1份腮腺，4份脑。对这些标本进行石蜡切片免疫细胞化进行诊断，以石蜡切片免疫组化结果作金标准，分析冰冻切片快速免疫组化的诊断准确率和耗时。本研究获得本院医学伦理委员会批准（K-20230141-W）。1.2方法快速免疫组化方法：将手术切除的新鲜组织置冰冻切片机载物台上，−22℃快速冷冻后4～6μm厚切片，将切片贴附于涂有3-氨丙基三乙氧基甲硅烷（3-aminopropyltriethoxysilane,APES）防脱剂的玻片上。经专用固定液固定后，在磷酸盐缓冲盐溶液（phosphatebuffersaline,PBS）中漂洗2次，每次15s，用通用免疫组化封闭液封闭60s后，辣根过氧化物酶多聚抗体室温孵育3min后，用PBS漂洗2次，每次15s，用二氨基联苯胺（diaminobenzidine,DAB）工作液显色3min，水洗2次，每次18s，用苏木素复染30s，水洗18s，脱水，透明，并用中性树脂封片。石蜡切片免疫组化方法：在烘片箱中放置20min化蜡，再经过3道二甲苯，每道10min，再进行梯度酒精水化，经PBS漂洗后，用微波炉或者高压锅进行抗原修复，用牛血清白蛋白（bovineserumalbumin,BSA）试剂阻断非特异性结合，再进行一抗孵育，通常一抗孵育需要在4℃状态下过夜，经PBS洗涤后，孵育二抗，用PBS将未结合的二抗去除，用DAB工作液显色5～8min，用苏木素复染30s，水洗，脱水，透明，并用中性树脂封片。恶性肿瘤的发病率逐年增高，是目前全国最重要的死亡原因之一[1]。病理诊断是多种疾病，尤其是恶性肿瘤的金标准。随着医学技术的发展，临床对于恶性肿瘤的诊断准确性和时效性有了更高的要求。为提高手术的精准性，在临床医生手术的同时，病理技术员将术中可疑组织制备成冰冻切片，并进行HE染色，交与病理医师，病理医师通过显微镜对冰冻切片进行观察，判断术中所取组织的良恶性，并发布诊断报告，术中快速冰冻切片的病理诊断结果是指导手术方案的一个重要指标[2]。因此，需要在术中标本切除后30min之内给出术中病理诊断报告，以便后续临床开展手术工作。但是肿瘤的生物学行为很难判断，影响因素很多，单单依靠形态学是不够的，单纯应用冰冻切片HE染色进行病理诊断，对于病理医生而言，具有一定难度[3-5]，需要进一步借助免疫组织化学的各种标志物来辅助和鉴别诊断。石蜡切片免疫组化技术虽然诊断准确率高，但耗时过长...
