172024,14(1)医师在线第14卷第1期·论著·葛根素对过氧化氢诱导人心肌细胞损伤的影响韩冰仪1，王震航1，薛姣姣1，顾晶1，张棋1，孙妍1，曾妙1，张靖唯2，金嘉康1，张璐3*（1沈阳医学院基础医学院，沈阳110034；2沈阳医学院口腔医学院，沈阳110034；3沈阳医学院科学实验中心，沈阳110034）【摘要】目的观察葛根素对过氧化氢（H2O2）诱导的人心肌细胞的线粒体功能的影响，并探求其机制。方法培养人心肌细胞系AC16，高糖完全培养基培养内加入与H2O2等体积的磷酸缓冲盐溶液作为对照组；通过H2O2（200μmol/L）诱导建立心肌细胞损伤模型（模型组）；并采用低、中、高剂量（50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）葛根素处理心肌细胞，给药48h后，采用MTT法检测细胞活力；以Westernblot检测Mzb1、磷酸化-Drp1/Drp1的蛋白表达；以一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况；以ATP检测试剂盒检测细胞内ATP的水平；通过脂质体转染siRNA沉默细胞内Mzb1的表达水平。结果与对照组相比，模型组细胞活力显著下降，细胞凋亡率明显升高，Mzb1表达量显著降低，ATP含量显著降低，磷酸化-Drp1/Drp1表达升高；与模型组相比，葛根素低剂量组、中剂量组和高剂量组AC16细胞中Mzb1及细胞活力有所恢复，细胞凋亡率显著降低，Mzb1表达明显升高，ATP含量显著升高，磷酸化-Drp1/Drp1表达明显下降；沉默Mzb1后，葛根素对细胞活力及磷酸化-Drp1/Drp1表达的影响均被阻断。结论葛根素通过Mzb1/Drp1通路恢复线粒体功能，改善H2O2诱导的心肌细胞损伤。【关键词】葛根素；心肌细胞；凋亡；线粒体功能EffectofpuerarinonhumancardiomyocytesinjuryinducedbyH2O2HANBing-yi*,WANGZhen-hang,XUEJiao-jiao,etal.*SchoolofBasicMedicalSciences,ShenyangMedicalCollege,Shenyang110034,China.【Abstract】ObjectiveTodetecttheeffectandmechanismofpuerarinonmitochondrialfunctionofhumancardiomyocytesinducedbyH2O2.MethodsAC16humancardiomyocyteswerecultured,theequalvolumeofPBSwithH2O2wasaddedintothehighglucosecompletemediumasthecontrolgroup,cellswereinducedbyH2O2(200μmol/L)toestablishamodelofcardiomyocytesinjury(modelgroup),andtreatedwithpuerarinatlow,mediumandhighdoses(50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L).After48hadministration,thecellviabilitywasdetectedbyMTTassay.TheproteinexpressionofMzb1andphosphorylation-Drp1/Drp1weredetectedbyWesternBlot....
