2023年第15期总第103期疾病防控61基层兽医实验室ELISA试验中常见问题的分析与应对刘贤云（湖南省桃源县畜牧水产事务中心，湖南常德415700）摘要：随着养殖业的快速发展，基层兽医实验室在保障动物健康和食品安全方面发挥着越来越重要的作用。酶联免疫吸附试验（ELISA）作为实验室常用的一种免疫学检测方法，具有操作简便、特异性强、重复性好等优点。然而在实际操作中，基层兽医实验室可能会遇到一些问题，影响试验结果的准确性和可靠性，需要给予解决。文章主要就其存在的问题与应对措施进行分析，以供同行参考。关键词：基层兽医实验室；ELISA试验；问题；应对方法作者简介：刘贤云（1978—），女，汉族，湖南桃源人，本科，兽医师，研究方向:动物疫病监测与检测。酶联免疫吸附测定试验目前成为兽医实验室最重要、使用最频繁、最广泛的血清学检测方法。其操作过程中，涉及环节和细节相对较多，若掌握得不太熟练或不理解实验原理，将直接影响检测结果的准确性。1样本采集或处理不当造成的假阳性和假阴性及对策1.1假阳性和假阴性问题对于样本采集或处理不当造成的假阳性和假阴性问题来说，其中假阳性问题有很大几率是由于样本污染或交叉反应导致的，如样本收集容器不干净或者样本之间发生了交叉污染；而假阴性问题往往源自样本处理不当，如储存条件不符合要求导致蛋白质变性和降解。此外，也可能是由于稀释不当或操作失误导致的检测灵敏度下降。1.2对策为了解决因样本采集或处理不当所造成的假阳性和假阴性问题，实验室应采取一系列的措施来确保样本的质量。首先，加强对样本采集和处理的规范培训，包括确保采样容器的清洁、消毒和采样人员的技术熟练程度。这样可以确保采样的准确性和可靠性，从而减少假阳性和假阴性的发生。此外，样本的分装、储存和运输也是关键环节。在分装过程中应保证样本的均匀性和代表性，避免因操作不当导致的误差；储存和运输过程中，温度控制和标本保存标识至关重要。温度的波动可能会影响样本的稳定性，而标识不清则会导致样本混淆或误用。因此，严格控制温度和保持清晰的标识是确保样本质量的重要措施。针对ELISA试验的样本处理，实验室必须遵循标准操作规程进行操作，每一步骤的准确性和规范性是保证试验结果可靠性的基础。在实验过程中，要严格遵循试剂盒说明书和实验室技术标准的步骤，避免实验误差；对于试剂的选择和使用也需谨慎，确保其质量和有效性。2试剂使用方面存在的问题及对策2.1存在的问题试剂的保存条件...
