中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生24焦磷酸测序技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的应用价值陶萍湖北省荆州市第二人民医院，湖北荆州434000摘要：目的研究在结核分枝杆菌耐药性检测中焦磷酸测序技术的价值。方法通过生物素标记引物扩增甲基因片段，通过经链亲和素标记的磁珠分离单链模板，对突变区甲基因耐药的序列进行检测，并对结果进行记录，与正常序列比对后对结核分枝杆菌的耐药进行判断。结果临床分离所得到的结核分枝杆菌株总共有108株，检测方法选择绝对浓度法，其中利福平敏感有44株（40.74%），耐药菌株有64株（59.56%）。本次研究总共得到108株菌株，通过不同的方法扩增上下游引物的基因片段，分别对高变区的rpoB基因片段进行处理，最终获得204bpDNA，产物通过琼脂糖凝胶电泳进行相应的处理，获得清晰度较高的DNA条带。最终只有2株未得到理想的结果，原始为由于制备的误差，其余临床株及H37Rv标准株均得到了较为准确的检测结果，其中有44株利福平敏感株未获取到rpoB基因突变核心区,有64株都发生了不同程度的突变，突变的类型总共有8种，其中有2株属于511和516位点的联合突变，最为常见的突变位点为531位和526位，531位突变率为68.75%,526位的突变率为18.75%，所均获得的焦磷酸测序图谱均较为清晰。在检测中突变的野生型结核分枝杆菌并未被发现，DNA序列测定的结果指出未发生突变的情况，发生了基因突变的结核分枝杆菌，研究显示其DNA测序结果和Pyrosequencing检测所获取的结果不存在区别，100%完全一致。结论在结核分枝杆菌耐药性检测中焦磷酸测序技术的运用价值较高，值得在临床上进行推广运用。关键词：结核性腹膜炎；抗原靶蛋白6；诊断价值；阳性率；灵敏度；特异度中图分类号：R378结核病属于一种较为古老的疾病，虽然在抗结核一线药物被成功研发后结核病得到了有效的控制，但全球结核病疫情自80年代起又出现了明显回升的情况，其中大量耐药结核杆菌的出现是结核病回升的较为主要想一个原因。调查研究结果指出，我国结核病的总耐药率约为28.00%，耐药菌株的出现与的传播在很大程度上影响了结核病的治疗[1]。如何准确有效的检查结核分枝杆菌的耐药性情况，已经逐渐成为了临床目前对结核病进行有效防治的重要方式。随着临床上对耐药分子机制研究结果的逐步升入，目前主要的结核分枝杆菌发生耐药的子机理为药物作用导致靶基因出现不同程度的突变，这为分子生物学方法在快速的进行结核分枝杆菌耐药性基因检测的运用打下了理论的基础[2...
