解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1ELISA检测实验方法1.实验原理ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的1.测定体液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等；2.测定激素，包括小分子量的甾体激素等；3.测定抗生素和药物；4.测定病原体抗原，HBsAg、HBeAg等；5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs等；解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn23.实验材料3.1.主要试剂（试剂来源仅供参考）试剂配方包被液PH=6.3的碳酸盐缓冲液。无水Na2CO20,1696g,NaHCO30.2856g,超纯水100ml。完全溶解后放到4OC一周内使用。PBSTNacl8.0g,Na2HPO4.12H202.9g,KCI0.2g,KH2PO40.24g,吐温200.5ml,超纯水1000ml。底物缓冲液0.2mol/LNa2HPO425.7ml,0.1mol/L柠檬酸，24.3ml,超纯水50ml3%H2O230%H202100ml,超纯水900ml显色剂底物缓冲剂10ml,3%H202150ul,OPD15mg,其中H202最后加。终止液将1X的浓硫酸缓慢加入到超纯水中，并搅拌散热解螺旋http://www.helixlife.cn/3.2.主要仪器仪器名称来源型号离心机ThermoFisherScientificMicro17RELISA板ThermoFisherScientific143761酶标仪BioTekEpoch-2566003.3.其他（请具体写明）本步骤为间接ELISA步骤。4.实验步骤1.包被：取所要包被的物质，提前设计好所需浓度，根据包被孔数计算所需包被物的量，用包被液稀释至所需体积，分加至各孔中。包...
