Caspase3活性检测试剂盒产品编号产品名称包装C1116Caspase3活性检测试剂盒100次产品简介:Caspase3活性检测试剂盒(Caspase3ActivityAssayKit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中Caspase3酶活性或纯化的Caspase3酶活性的试剂盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase3也称CPP32、Yama或apopain,有时被写作caspase-3或caspase3,属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。Caspase3可以剪切procaspase2、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase),ICAD(Inhibitorofcaspase-activateddeoxyribonuclease),gelsolin和fodrin等。这些由caspase3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatincondensention),DNA片段化(DNAfragmentation)等。同时caspase3对细胞起泡(Cellblebbing)也起到关键作用。本Caspase3活性检测试剂盒是基于casepase3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。试剂盒中提供了caspase3催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase3酶活性的标准品。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测100个样品。包装清单:产品编号产品名称包装C1116-1裂解液30mlC1116-2检测缓冲液10ml/瓶,共2瓶C1116-3Ac-DEVD-pNA(2mM)200μl/管,共5管C1116-4pNA(10mM)1ml—说明书1份保存条件:-20℃保存,Ac-DEVD-pNA和pNA需避光保存。注意事项:须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。Ac-DEVD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006),可向碧云天订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。有文献报道少数类型的细胞凋亡检测不到caspase3的激活。pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖...