RegulationofHippopathwaytranscriptionfactorTEADbyp38MAPK-inducedcytoplasmictranslocationP38MAPK诱导Hippo通路核心转录因子TEAD质转位（TEAD非Hippo途径调控）1.研究背景2.论文思路3.技术路线4.结果详解目录/contents5.学习参考研究背景1研究背景0104HippopathwayMst1/2,MAPK4Ks,Lats1/2YAP/TAZTEADnucleocytoplasmicshuttling020305理论基础科学问题??Hippo调控器官大小、癌症表型SMAD…辅因子结合的转录因子核质穿梭调控TEAD核质穿梭控制尚不明确YAP/TAZ关键辅因子条件变化Hippo通路YAP/TAZ去磷酸化、核转位下游：YAP/TAZ结合TEAD共激活下游转录Hippo上游：Mst/MAPK/Lats去磷酸化失活YAP/TAZ响应：去磷酸化活化Hippo通路效应分子YAP葡糖浓度通过AMPK直接影响YAP活性Hariharan,I.K.(2015).EnergystresstamestheHippopathway.Naturecellbiology,17(4),362-363.AMPK敲除Hippo通路仍可响应能量水平表明AMPK对YAP活性调控存在代偿途径.YAPser109位磷酸化被OGT介导的糖基化修饰取代Peng.C.(2017).Regulationofthehippo-YAPpathwaybyglucosesensorO-GlcNAcylation.Molecularcell,68(3),591-604.YAP存在多个Ser、Thr修饰位点（S占比10%T7%）.TEAD中S占比8%、T4%转录因子TEADTEAD非Hippo依赖调控途径1（VGLL竞争抑制TEAD与YAP结合）TEAD非Hippo依赖调控途径2……Lin,K.C.,Park,H.W.,&Guan,K.L.(2017).RegulationoftheHippoPathwayTranscriptionFactorTEAD.Trendsinbiochemicalsciences.常规：依赖Hippo激活途径（YAP-TEAD形成复合体）论文思路2论文思路010203生物学问题？Hippo调控生物器官大小、癌症表型调控方式主要是转录调控哪些因子被遗忘？核心转录因子TEAD/YAPTEAD核质穿梭机制不明被遗忘的因子能否有新发现？TEAD的核质穿梭机制是否与YAP结合的其他转录因子不一致思路框架020304条件差异-表型鉴定筛选出特殊条件调控通路鉴定筛选出特异通路因子互作与调控分子机制生理功能关联回归生物学问题01技术路线3技术路线筛选压力应激压力：渗透胁迫为代表YAP质转位诱导因素：血清饥饿为代表表型差异通路筛选TEAD为核心：敲除p38与压力相关：通路抑制+p38敲除鉴定表型：wb检测p38、p-p38、TEAD…qPCR检测YAP/TEAD复合体靶基因免疫荧光检测TEAD、YAP核质穿梭通路鉴定因子互作TEAD序列分析：功能域分析IP检测：p38\TEAD\YAP结合体外/细胞实验：TEAD\p38序列突变与体外表达IP检测结合序列突变+过表达+免疫荧光因子互作、调控因子调控TEAD/lats敲除qPCR检...
