解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1II型胶原诱导性DBA/1小鼠关节炎模型1.实验原理胶原诱导性关节炎(collageninducedarthritis，CIA)动物模型，是由Trentham等于1977年最先创建的实验性关节炎模型。研究发现约50%的类风湿关节炎（Rheumatoidarthritis，RA）患者血液中存在抗Ⅱ型胶原的自身抗体，提示Ⅱ型胶原可能诱导RA的产生。Ⅱ型胶原大量存在于关节软骨中，用异源性Ⅱ型胶原免疫动物，可诱导体内产生针对关节软骨中的Ⅱ型胶原的自身免疫反应，建立胶原诱导性关节炎模型。目前已建立大鼠、小鼠CIA模型。CIA模型中CD4+T细胞起着主要调节因素，而抗胶原蛋白Ⅱ型自身抗体、炎性细胞因子等体液免疫因素也在其病理过程中起到重要作用。CIA是目前国际上公认的RA相关研究的最佳动物模型。CIA模型可用于类风湿性关节炎的发病机制、自身免疫病理调节、细胞因子作用的研究以及类风湿性关节炎药物的药效学研究。DBA/1小鼠对CIA易感性较高，目前常使用其建立CIA模型。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的建立类风湿关节炎相关的实验动物模型，对RA进行研究。3.实验材料3.1.主要试剂试剂来源Cat.No.牛Ⅱ型胶原（冻干粉,10mg）Chondrex20021完全弗氏佐剂（1mg/ml）Chondrex7008不完全弗氏佐剂Chondrex7002麻醉剂动物房提供冰醋酸试剂科提供解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn23.2.主要仪器仪器名称来源型号电子计重台秤德国SartoriusLE225D电动剃刀飞科1ml无菌注射器BD3008413.3.其他（请具体写明）实验动物要求准备：SPF级DBA/1雄性小鼠，鼠龄6-8周，体重20g±2g。4.实验步骤(1)造模前一天准备小鼠造模的试剂Ⅱ型胶原：CⅡ溶于3.3ml0.1M冰醋酸中，浓度3mg/ml(2)初次免疫1)乳化胶原乳化的过程中，3.3ml完全弗氏佐剂分三次加入到胶原中进行乳化，乳化的整个操作过程都在冰上进行，最终乳化至胶原滴在水上没有油散开，形成水包油的状态。解螺旋http://www.helixlife.cn/2)造模每只小鼠腹腔注射0.4ml麻醉剂（或使用动物房的二氧化碳麻醉机），待小鼠麻醉后用电动剃刀剔去尾根部被毛，在尾根部皮内注射100µl乳化胶原。(3)加强免疫1)在初次免疫21天后进行第二次加强免疫，免疫前一天准备小鼠第二次免疫的麻醉剂和胶原，Ⅱ型胶原：CⅡ溶于3.3ml0.1M冰醋酸中，浓度3mg/ml。2)乳化胶原乳化的过程中，3.3ml不完全弗氏佐剂分三次加入到胶原中进行乳化，乳化的整个操作过程都在冰上进行。最终乳化至胶原滴在水上没有油散开，形成水包油的状...
