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第一篇-第2章-核酸的结构与功能.pdfVIP免费

第一篇-第2章-核酸的结构与功能.pdf_第1页
【2.2.5】核酸的理化性质核酸具有强烈的紫外吸收【2022018A】在中性条件下,最大吸收值在260mn附近根据260nm处的吸光度(A260),可以判断出溶液中的DNA或RNA的含量还可以利用260nm/280nm的吸光度比值判断核酸样品的纯度DNA1.8RNA2.0DNA变性定义某些极端的理化条件(温度、pH、离子强度等)可以断裂DNA双链互补碱基对之间的氢键以及破坏碱基堆积力,使一条DNA双链解离成为两条单链,这种现象称为DNA变性DNA变性破坏了DNA的空间结构,但没有改变DNA的核苷酸序列方法使DNA变性的最简单和最直接的方法是加热增色效应在DNA解链过程中,有更多的包埋在双螺旋结构内部的碱基得以暴露,含有DNA的溶液在260nm处的吸光度随之增加解链温度(Tm)【2013026A】【2018018A】【2019027A】【2017142X】在解链曲线上,紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度在此温度时,50%的DNA双链解离成为了单链DNA的Tm值与DNA长短以及碱基的GC含量相关GC的含量越高,Tm值越高;离子强度越高,Tm值也越高变性的核酸可以复性或形成杂交双链复性把变性条件缓慢地除去后,两条解离的DNA互补链可重新互补配对形成DNA双链,恢复原来的双螺旋结构退火热变性的DNA经缓慢冷却后可以复性将热变性的DNA迅速冷却至4℃时,两条解离的互补链还来不及形成双链,所以DNA不能发生复性PCR技术的关键步骤杂化双链将不同种类的DNA单链或RNA单链混合在同一溶液中,只要这两种核酸单链之间存在着一定程度的碱基互补关系,它们就有可能形成杂化双链核酸分子杂交可以在两条不同的DNA单链之间形成,也可以在两条RNA单链之间形成,甚至还可以在一条DNA单链和一条RNA单链之间形成应用Southern印迹、Northern印迹、斑点印迹、原位杂交、PCR扩增、基因芯片等用来研究DNA片段在基因组中的定位、鉴定核酸分子间的序列相似性、检测靶基因在待检样品中存在与否等【2.2.4】其他非编码RNA的分类与功能【2.2.4.1】组成性非编码RNA催化小RNA【2017120B】即核酶,是细胞内具有催化功能的小分子RNA具有催化特定RNA降解的活性,在RNA合成后的剪接修饰中具有重要作用考研范围内会遇到的包括SnRNA(剪接体剪hnRNA)、RNaseP(加工tRNA)以及肽酰转移酶(翻译中,肽链的形成)核仁小RNA(snoRNA)定位于核仁,主要参与rRNA的加工tRNA【九版修改为rRNA】的核糖C-2'的甲基化过程和假尿嘧啶化修饰都需要snoRNA的参与核小RNA(snRNA)参与了真核细胞mRNA的成熟过程识别hnRNA上的外显子和内含子的接点,切除内含子5'-端...

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