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第4篇-第3章-基DNA重组和重组DNA技术.pdfVIP免费

第4篇-第3章-基DNA重组和重组DNA技术.pdf_第1页
重组DNA技术在医学中的应用重组DNA技术广泛应用于生物制药可用于改造传统的制药工业利用该技术生产有药用价值的蛋白质/多肽及疫苗抗原等产品利用重组DNA技术,可以让细菌、酵母等低等生物成为制药工厂,也使基因工程细菌成为各类生物基因的储藏所可以将小鼠杂交瘤细胞人源化,让其产生人源化抗体可以制造基因工程病毒,使病毒保留免疫原性,缺乏感染性或变成不含核酸的类病毒颗粒重组DNA技术是医学研究的重要技术平台遗传修饰动物模型的医用研究遗传修饰细胞模型在医学研究中的应用基因及基因功能的获得及丧失的研究重组DNA技术是基因及其表达产物研究的技术基础在基因组水平上干预基因在RNA水平上干预基因的功能研究蛋白质的相互作用重组DNA技术定义是指通过体外操作将不同来源的两个或两个以上DNA分子重新组合,并在适当细胞中扩增形成新功能DNA分子的方法主要过程在体外将目的DNA片段与能自主复制的遗传元件(又称载体)连接,形成重组DNA分子,进而在受体细胞中复制、扩增及克隆化,从而获得单一DNA分子的大量拷贝在克隆目的基因后,还可针对该基因进行表达产物蛋白质或多肽的制备以及基因结构的定向改造重组DNA技术中常用的工具酶【2008127B】【2008128B】【2009039A】【2023147X】对目的DNA进行处理时,需利用序列特异性限制性核酸内切酶(RE),RE在准确的位置切割DNA,使较大的DNA分子成为一定大小的DNA片段构建重组DNA分子时,必须在DNA连接酶催化下才能使DNA片段与载体共价连接限制性核酸内切酶【2010038A】是最重要的工具酶,能识别双链DNA分子内部的特异序列并裂解磷酸二酯键分类Ⅰ型和Ⅲ型酶为复合功能酶同时具有限制和DNA修饰两种作用,且不在所识别的位点切割DNA(即特异性不强)Ⅱ型能在DNA双链内部的特异位点识别并切割,故其被广泛用作"分子剪刀",对DNA进行精确切割重组DNA技术中所说的RE通常指Ⅱ型酶RE识别及切割特异DNA序列大多数RE的识别序列为回文序列回文结构是指在两条核苷酸链的特定位点,从5'→3'方向的序列完全一致重组DNA技术中常用的载体【2019026A】载体是为携带目的外源DNA片段、实现外源DNA在受体细胞中无性繁殖或表达蛋白质所采用的一些DNA分子克隆载体【2011039A】是指用于外源DNA片段的克隆和在受体细胞中扩增的DNA分子基本特点至少有一个复制起点使载体能在宿主细胞中自主复制,并能使克隆的外源DNA片段得到同步扩增至少有一个选择标志,从而区分含有载体和不含有载体的细胞有适宜的RE单一切点,可供外源基因插入...

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