实验一红细胞计数、白细胞计数实验诊断学第一临床医学院检验医学系实验诊断学教研室实验内容实验内容红细胞计数红细胞计数((RedbloodcellcountRedbloodcellcount))白细胞计数白细胞计数((WhitebloodcellcountWhitebloodcellcount))手工显微镜计数法细胞计数仪法(直接计数法)(间接计数法)利用电阻抗和(或)光散射原理计数方法一、红细胞计数(手工显微镜法)一、红细胞计数(手工显微镜法)用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经过换算求得每升血液中的红细胞数量。1.原理显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板2.器材手工显微镜计数法原理手工显微镜计数法原理改良Neubauer计数板充池显微镜观察细胞数/L等渗稀释液微量吸管检测试剂:检测试剂:RBCRBC稀释液稀释液①①HayemHayem稀释液:稀释液:NaCl,NaNaCl,Na22SOSO44,,HgClHgCl22②②枸橼酸钠甲醛盐水溶液枸橼酸钠甲醛盐水溶液::枸橼酸钠,甲醛,枸橼酸钠,甲醛,NaClNaCl③③生理盐水或含生理盐水或含1%1%甲醛的生理盐水:仅在急诊或无甲醛的生理盐水:仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用上述两种稀释液时临时使用改良Neubauer计数板大方格→中方格→小方格大方格→中方格→小方格(9个)(25个)(16个)充液位置充液位置为红细胞计数区域压线细胞的计数原则:数左不数右,数上不数下为红细胞计数区域3.3.检测方法检测方法①①小试管加小试管加RBCRBC稀释液稀释液2.0ml2.0ml。。②②采血,取血采血,取血1010μμll。。③③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~32~3次,立即混匀。次,立即混匀。④④混匀后充入计数室,静置混匀后充入计数室,静置3~5min3~5min,高倍镜下计,高倍镜下计数。数。检测方法检测方法2ml稀释液充分混匀10μl血液充池、静止镜下计数4.4.计算计算男性:男性:(4.0(4.0~~5.5)×105.5)×101212//LL女性:女性:(3.5(3.5~~5.0)×105.0)×101212//LL新生儿:新生儿:(6.0(6.0~~7.0)×107.0)×101212//LLRBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106=5个中方格内RBC数/100×1012RBC:△△△×1012/L6.参考值5.报告方式二、白细胞计数(手工显微镜法)二、白细胞计数(手工显微镜法)WBCWBC稀释液稀释液::冰醋酸冰醋酸3.0mL3.0mL(破坏红细胞)(破坏红细胞)蒸馏水蒸馏水97.0mL97.0mL亚甲蓝(染色)亚甲蓝(染色)1.1.检测方法检测方...