实验二白细胞分类计数(ManualDifferentialWBC)实验诊断学第一临床医学院检验医学系实验诊断学教研室概念概念•外周血中五种类型白细胞的相对百分比和绝对值。•一般情况计数100个白细胞,并计算出各种白细胞所占的比例,同时观察各种细胞的形态(大小、外形、胞质、胞核)有无变化。中性粒细胞中性粒细胞5050~~70%70%淋巴细胞淋巴细胞2020~~40%40%单核细胞单核细胞33~~8%8%嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞0.50.5~~5%5%嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞00~~1%1%正常参考值临床意义•外周血中白细胞主要由中性粒细胞和淋巴细胞外周血中白细胞主要由中性粒细胞和淋巴细胞组成,这两种细胞的升高或减低可直接导致白组成,这两种细胞的升高或减低可直接导致白细胞总数相应的改变。细胞总数相应的改变。中性粒细胞中性粒细胞淋巴细胞淋巴细胞感染或化脓性炎症感染或化脓性炎症急性中毒急性中毒急性出血急性出血恶性肿瘤恶性肿瘤某些感染某些感染某些血液病某些血液病脾亢和免疫性疾病脾亢和免疫性疾病射线、化学药物射线、化学药物、、金属金属升高升高减低减低再障等相对增多再障等相对增多传淋、传单、结核等传染传淋、传单、结核等传染病恢复期病恢复期急、慢性淋巴细胞白血病急、慢性淋巴细胞白血病相对减少相对减少传染病急性期传染病急性期放射治疗或放射病放射治疗或放射病细胞免疫缺陷病细胞免疫缺陷病升高升高降低降低某些感染某些感染血常规检验流程血常规检验流程•样品采集样品采集:静脉采血、毛细血管采血:静脉采血、毛细血管采血•自动化血细胞分析仪自动化血细胞分析仪•WBCWBC手工分类计数手工分类计数样品采集样品采集•紫色真空采血管紫色真空采血管•抗凝剂:抗凝剂:EDTA-KEDTA-K221.5-2.0mg/ml1.5-2.0mg/mlHemocytometerHemocytometer试验步骤试验步骤1.血涂片的制备血涂片的厚薄的影响因素:推片角度:30~40度血样的红细胞压积血样的粘滞度WBC手工分类计数largeanglelowHCTsmallanglehighHCT血涂片制作:推片载玻片血液将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄)一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B123尾体头Wright-Giemsa染色:•甲醇:将细胞固定在玻片上•美兰染液与RNA、DNA结合------蓝色/紫色•伊红与Hb、嗜酸性颗粒结合------粉色/红色•磷酸盐缓冲液的pH值非常重要!2.2.血涂片染色血涂片染色血涂片染色:勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ...