细胞培养技术细胞培养技术cellculturecellculture上海交通大学医学院瑞金临床医学院洪秀华教授细胞培养技术细胞培养技术从生物体内取出组织或细胞，在体外(invitro)模拟体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下，对这些组织或细胞进行孵育培养，使之保持一定的结构和功能，以便于我们观察研究，这种方法就是细胞培养（cellculture）。有时细胞培养也称为组织培养（tissueculture），二者可作为同义语使用。细胞培养的工作始于20世纪初目前广泛应用于生物学、医学的各个领域，并且是各种细胞工程技术的基础。哈里森（Harrison，1907），因此被称为“组织培养之父”一、基础理论一、基础理论（一）培养细胞的类型及其特点体外培养细胞大多培养在瓶皿等容器中，根据它们是否能贴附在支持物上生长的特性，可分为贴附型和悬浮型两大类。（（11）贴附型）贴附型大多数培养细胞均为贴附型，它们必须贴附在支持物表面生长，这类细胞在体内时各自具有其特殊的形态，但在体外培养时贴附于支持物后形态上表现单一化而失去体内原有的某些特征，多呈上皮样或成纤维细胞样。培养细胞的类型及其特点培养细胞的类型及其特点贴附细胞型MRC-5成纤维细胞培养细胞的类型及其特点培养细胞的类型及其特点•贴附型细胞正常猴肾单层上皮细胞正常贴附型细胞的特点正常贴附型细胞的特点接触抑制：正常贴附型细胞具有接触抑制的特性，细胞相互接触后可抑制细胞的运动，因此细胞不会相互重叠于其上面生长。密度抑制：细胞生长、汇合成片后，虽发生接触抑制，但只要营养充分，仍可增殖分裂，但当细胞数量达到一定密度后，由于营养的枯竭和代谢物的影响，细胞分裂停止，称为密度抑制。肿瘤细胞的接触抑制及密度抑制往往减弱或消失，因此细胞可向三维空间发展，导致细胞堆积，并可生长至较高的终末细胞密度。(2)(2)悬浮型悬浮型少数细胞在培养时不贴附于支持物上，而以悬浮状态生长，包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞，尤其是血液白细胞，以及一些肿瘤细胞。细胞悬浮生长时可以呈单个细胞或细小的细胞团，胞体为圆形。其优点是在培养液中生长，生存空间大，允许长时间生长，便于大量繁殖。（二）培养细胞的增殖过程（二）培养细胞的增殖过程培养细胞的生命期培养细胞的生命期（lifespan）指的是细胞在培养中持续增殖和生长的时间，一般可分为原代培养期、传代期和衰退期。从体内取出细胞接种培养到第一次传代叫原代培养，一般持续1-4...
