检生学院重点实验室洪丹20171107电泳技术及应用目录电泳定义电泳原理电泳分类一、二、三、电泳应用四、电泳(Electrophoresis)带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象;电泳技术(ElectrophoresisTechnique)带电荷物质(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其百分含量的方法。电泳仪(Electrophoresister)可以实现电泳分离技术的仪器。定义(一)电泳的基本原理物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正负电荷量相等,故不显示带电性;一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子);不同的物质,由于带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。原理若将带净电荷Q的粒子放入电场(电场强度E),则该粒子所受到的电荷引力F引:F引=EQ根据Stoke在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻:F阻=6πrηV(r:粒子半径,η:溶液粘度,V:粒子移动速度)当F引=F阻时EQ=6πrηVV=EQ/6πrη由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶液的粘度(η)成反比。原理电场强度溶液的pH值溶液的离子强度电渗作用原理(二)影响电泳的外界因素1.根据工作原理的不同:可分为移界电泳、区带电泳、等速电泳、等电聚焦电泳、免疫电泳等。2.根据有无固体支持物:自由电泳和支持物电泳等。3.根据支持载体的位置或形状:水平电泳、垂直电泳、板状电泳、柱状电泳、U型管电泳、倒V字形电泳、毛细管电泳等。4.根据支持物的特点:①无阻滞支持物电泳;②高密度的凝胶电泳等。分类5.根据电源控制的不同,一般可分为以下3类:①恒压电泳;②恒流电泳;③恒功率电泳等。6.根据自动化程度的不同,可分为半自动和全自动型。7.根据其功能的不同,可分为制备型、分析型、转移型、浓缩型等。8.根据用法的类型可分为:双向电泳、交叉电泳、连续纸电泳、电泳-层析相结合技术等。9.根据不同的使用目的可分为:核酸电泳、血清蛋白电泳、制备电泳、DNA测序电泳等。分类1.凝胶电泳定义:以琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。2.实验室常用电泳技术:①琼脂糖凝胶电泳(AgaroseGel...