胎鼠软骨细胞原代分离所需器材：显微手术器械、显微镜、EP管等所需试剂：DEME、FBS、100×Penicillin-Streptomycin(100mM)、0.25%Trypsin、0.04%CollegenasetypeⅡ等分离方法：1.分离所得胎鼠软骨浸泡于含2×P/S的DMEM基础培养基中存放，每只胎鼠用1个EP管。所有胎鼠软骨取完后，500g离心10min，弃上清；2.各EP管加500μl含2×P/S的PBS洗涤，500g离心10min，弃上清；此步骤重复1次；3.各EP管加500μl含2×P/S的PBS重悬，将软骨与PBS转移至另一个已经称重并标记号的EP管中，500g离心10min，彻底吸干上清；4.再次称重，减重法计算胎鼠软骨的重量；5.各管按0.01g加100μl0.25%Trypsin的比例加入Trypsin，37℃水浴20min,中间适时摇匀；7.加入50μlFBS终止消化，加PBS配平，500g离心10min，弃上清；9.加500μl含2×P/S的PBS洗涤，500g离心10min，弃上清，重复该操作1次；10.各管按0.01g加100μl加0.04%CollegenasetypeⅡ，37℃水浴17～20h；12.加PBS配平，500g离心10min，弃上清；13.加500μl含2×P/S的PBS洗涤，500g离心10min，弃上清，重复该操作1次；14.各管加1ml含10%FBS、1×P/S的DMEM完全培养基重悬；15.所得细胞悬液种于6孔板，补充培养基至终体积2ml；16.5%CO2，37℃，饱和湿度条件培养，每3d换1次液。
