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入室考试复习(1)(1).docVIP免费

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㈠、分光光度法是利用物质所特有的吸收光谱来鉴别物质或测定其含量的一项技术。特点:①灵敏度高、精确度高;②操作简便、快速;③对于复杂的组分系统,无须分离即可检测出其中所含的微量组分。分光光度法所使用的光谱范围主要是波谱图中200~1000nm这一段波长的光谱。紫外光区:200~400nm可见光区:400~760nm红外光区:760~1000nm分光光度计使用的注意事项试管架或试剂瓶不得放置于仪器上,以防试剂溅出腐蚀机壳。拉杆动作要轻,防溶液溅出,腐蚀机件。比色杯应持其侧壁的毛玻璃面。盛液时不能太满(约达比色杯2/3体积),外壁如有液体,只能用滤纸沾去水份,再用擦镜纸擦干净。测毕,比色液一般应倒回原试管中,直至计算无误后方可倒掉。㈡、按转速分类:分为低速离心机、高速离心机、超速离心机1.低速离心机:T转速在10000rpm以内或相对离心力在15000×g以内T实验室中常用于细胞和大分子的分离制备。2.高速离心机:T转速在10000-30000rpm以内或相对离心力在15000-70000×g以内T常用于生物大分子的分离制备3.超速离心机:T转速在30000rpm以上或相对离心力在70000×g以上。T常用于分离亚细胞器、病毒粒子、DNA、RNA和蛋白质分子。据离心机的用途可分为:分析型,制备型和分析制备型。2.差速离心a、差速离心法可以用来分离细胞,亚细胞结构或高分子。差速离心比较适用于差异比较明显的细胞或细胞器的分级分离,经过多次离心可以获得满意的效果。原理:利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别,在同一离心条件下,沉降速度不同,通过不断增加相对离心力,使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。b、密度梯度离心也称区带离心法。是将样品加在惰性梯度介质中进行离心沉降或沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度中某些特定位置上形成不同区带的分离方法。等密度梯度离心等密度离心法也叫沉降平衡法。所谓等密度是指样品密度与介质的密度相等,实际上是在梯度密度介质中进行的。㈢、气溶胶(aerosols):悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子(粒径一般为0.001~100μm)形成的相对稳定的分散体系㈣一级防护屏障:是通过生物安全柜、负罩等实验设备和个人防护装备实现的,操作者和被操作对象之间的隔离。㈤、PCR仪使用方法(1)首先准备好反应管;(2)打开机盖,将反应管平稳、端正地置入,盖好机盖;(3)打开电源开关,按照机器屏幕显示的提示设定程序。(4)运行程序。PCR仪维护常识。1、打开PCR仪机盖开关要轻,防止损坏盖锁,PCR仪工...

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