解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1免疫磁珠分选细胞1.实验原理用免疫磁珠做细胞分选是高效简捷的免疫细胞及其它细胞的分离纯化方法，MACS（magnetic-activatedcellsorting）磁珠分选的原理：MACS分选是基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在分选柱内，而无该种表面抗原的细胞由于不能与连接有磁珠的特异性单抗相结合而没有磁性，不在分选柱内停留，进而使细胞得以分离。分为有柱式分选和无柱式分选。分选策略包括：(1)阳性分选（磁珠标记的细胞为目的细胞）①目的细胞被磁性标记后，作为阳性标记组分直接分选出来。②分选后的细胞不必去除MACS微珠，可立即用于培养或者后续操作。该方法可以将磁性标记的靶细胞富集10000倍。③阳性分选策略优点：纯度高，回收率高，操作迅速、简便。(2)去除分选/阴性分选（磁珠标记的细胞为非目的细胞）①是把非目的细胞磁性标记后从细胞混合物中去除的方法，即未磁性标记的细胞为目的细胞。解螺旋http://www.helixlife.cn/②MACS分选柱技术加上强磁性标记可以去除高达4个对数级的细胞。③去除分选策略适用范围：去除不需要的细胞;缺乏针对目的细胞的特异性抗体(如肿瘤细胞);不需要抗体和目的细胞结合，即细胞不被激惹(如T细胞、B细胞、NK细胞功能分析);复合分选的一部分。(3)多重分选策略-获得多参数细胞，一般是先“阴性分选”再“阳性分选”①细胞亚群的分选，可以先磁性标记非目的细胞，去除分选后对阴性组分再行磁性标记和阳性分选。②适用范围：在细胞悬液中，非目的细胞也表达用来阳性选择目的细胞的抗原，就需要先去除这群非目的细胞;如果要分选非常稀有细胞，先从细胞悬液中去除非目的细胞，在富集细胞的基础上，进行阳性分选，可获得高纯度目的细胞。(4)多重分选①MACS多重分选是一种根据多种表面标志磁性分选细胞的技术。解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn2②多重分选中，首先用MACS多选微珠标记目的细胞，进行第一参数阳性分选。然后细胞与多选解离试剂共同孵育，后者可以将微珠从抗体上酶性解离下来。接着使用针对另一细胞表面标志的抗体-微珠复合物磁性标记阳性分选细胞。二次标记的细胞可以再次进行阳性分选或者去除分选。(5)REAlease磁珠分选①REAleaseMicrobeads是一类基于重组基因工程改造抗体而研发的新型磁分选产品，使用方便，磁珠和标记的抗体片段均可灵活去除。②REAlease磁珠操作步骤步骤1：...
