克隆形成-Foci1.细胞被干预（药物处理，转染，电转，感染）24小时后，作活细胞计数（台盼蓝染色），把500，1000,1500,2000,2500，3000个活细胞分别接种至6孔板中，注意细胞接种一定要均匀，如果是药物处理，要考虑是否继续加药处理，如果是转染，电转，感染，一般考虑不再进行第二次处理；培养总体积为（1-2ml），不要加入太多培养基，因为细胞自身分泌的生长因子浓度太低了，不利于自身生长；2.每隔2-3天，观察细胞的生长状态，并根据营养的消耗情况，及时换液；随着细胞的生长，可以逐步增加培养基的用量，跟踪观察细胞的生长情况，7-14天，待细胞克隆长至合适大小（100-200uM）取出，结晶紫染色，然后把盖子拿掉，用照相机拍照，注意拍6孔板的全貌,手工计数克隆的数量，对数据进行统计分析；3.实验周期比较长，一定要注意无菌操作，可以在培养液中加抗生素防止污染；注意事项：1.每孔接种细胞的数量，上面设计了6个细胞梯度，已经充分考虑了各种细胞的大小与生长速度；2.细胞一定要接种均匀，否则导致假阳性；3.注意培养基加入量要随时根据细胞的生长状态和密度调整；4.注意无菌操作，整个检测窗口为期7-14天，期间污染风险一定要控制；5.细胞接种至6孔板是否继续进行细胞干预？决定于处理因素起作用的时间；
