解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1间接共培养1.实验原理将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上，然后将这两种载体置于同一培养环境之中（transwell小室），使不同种类的细胞共用同一种培养体系而不直接接触。共培养体系主要作用：诱导细胞向另一种细胞分化；诱导细胞自身分化；维持细胞功能和活力；调控细胞增殖；促进早期胚胎发育和提高代谢产物产量。将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。两种细胞联合培养，研究其中一种细胞分泌的因子对另一细胞性能的影响，此时选择小于3.0μm孔径，细胞不会迁移通过，将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的研究细胞B分泌的因子对细胞A迁移能力的影响3.实验材料3.1主要试剂细胞A、细胞B，培养基，血清，Transwell小室等3.2主要仪器细胞培养箱，生物安全柜，荧光显微镜等。解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn24.实验步骤1.将处于对数生长期的两种细胞分别消化，细胞计数，制备成细胞悬液；2.将细胞B接种于Transwell小室的下室，细胞A接种于Transwell小室的上室（为了避免血清的诱导趋向作用，上下室的血清浓度应当一致），细胞的接种量因细胞而异，可通过预实验预先确定；3.24小时（时间因细胞而异，可通过预实验确定）后，按Transwell迁移实验的操作，计算细胞迁移。解螺旋http://www.helixlife.cn/5.型文献1-31.KimS,McIlwraithE,ChalmersJ,BelshamD.Palmitateinducesananti-inflammatoryresponseinimmortalizedmicroglialBV-2andIMGcelllinesthatdecreasesTNFalphalevelsinmHypoE-46hypothalamicneuronsinco-culture.Neuroendocrinology2018.2.YangT,ZhangW,WangL,etal.Co-cultureofdendriticcellsandcytokine-inducedkillercellseffectivelysuppresseslivercancerstemcellgrowthbyinhibitingpathwaysintheimmunesystem.BMCCancer2018;18(1):984.3.LiuT,LiangH,LiuL,etal.InfluenceofpristineandhydrophobicZnOnanoparticlesoncytotoxicityandendoplasmicreticulum(ER)stress-autophagy-apoptosisgeneexpressioninA549-macrophageco-culture.EcotoxicolEnvironSaf2018;167:188-95.
