样品存贮及相关设备实验室基本仪器技术课程实验室样本保存的种类生物大分子(蛋白、核酸)细菌、酵母血液、组织其他(试剂、组织液等)细胞(贴壁、悬浮)细胞(贴壁、悬浮)生物大分子保存的主要因素温度(加速反应)水分(加速反应和霉变)光线(光化作用)空气(水分、氧气、微生物)PH值(稳定范围)时间(保存期限)⑴空气:空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物的污染可使样品腐败变质,样品吸湿后会引起潮解变性,同时也为微生物污染提供了有利的条件。某些样品与空气中的氧接触会自发引起游离基链式反应,还原性强的样品易氧化变质和失活,如维生素C、巯基酶等。⑵温度:每种生物大分子都有其稳定的温度范围,温度升高10℃,氧化反应约加快数倍,酶促反应增加1~3倍。因此通常绝大多数样品都是低温保存,以抑制氧化、水解等化学反应和微生物的生成。⑶水份:包括样品本身所带的水份和由空气中吸收的水份。水可以参加水解、酶解、水合和加合。加速氧化、聚合、离解和霉变。⑷光线:某些生物大分子可以吸收一定波长的光,使分子活化不利于样品保存,尤其日光中的紫外线能量大,对生物大分子制品影响最大,样品受光催化的反应有变色、氧化和分解等,通称光化作用。因此样品通常都要避光保存。⑸样品的pH:保存液态样品时注意其稳定的pH范围,通常可从文献和手册中查得或做实验求得,因此正确选择保存液态样品的缓冲剂的种类和浓度就十分重要。⑹时间:生化和分子生物学样品不可能永久存活,不同的样品有其不同的有效期,因此,保存的样品必须写明日期,定期检查和处理。DNA保存短期保存,加无菌水或TE缓冲液,4°或-20°。长期保存,刚提取好的DNA直接保存到乙醇里,放-20°或者-70°。需要用的时候,再离心后,弃去乙醇,加水或TE溶解即可。DNA本来就是酸性,所以需要弱碱性环境保存,如果用中性或者酸性环境保存时间长容易降解。保存时间长会降解。所以还是要尽快的利用了。有文献报道高纯DNA的最佳保存条件是4度,提纯的DNA放在4°一段时间(数周-数月)都没问题。但是长期保存建议-20°或-70°,并且浓度不能太低。RNA保存保存RNA应该尽量低温。若要长期保存,需沉淀下来后置于无水乙醇冻在-70度,用的时候再离心下来除去无水乙醇,用DEPC水溶解。为了防止痕量RNase的污染,从富含RNase的样品(如胰脏、肝脏)中分离到的RNA需要贮存在甲醛中以保存高质量的RNA,为了增加贮存RNA样品的稳定性,可以将RNA溶解在去离子的...