第13卷第12期Vo1．13No．12中医药导报GuidingJournalofTCM免疫共沉淀技2007年12月December．2007术的研究进展StudyProgressofCo—-immunoprecipitationTechnology郭纯(湖南省人民医院，湖南长沙410005)[摘要]免疫共沉淀(CO—immunoprecipitation)技术是检测蛋白质问相互作用的经典方法，也是较常用的方法。文章对近1O余年有关免疫共沉淀技术的原理和应用及其优缺点的分析进行文献综述。[关键词]免疫共沉淀；蛋白质；相互作用；技术[Abstract]Co—immunoprecipitationtechnologyisclassicalme~odtoexaminetheinteractionamongproteins，alsoacommonmethod．Thepapermadealiteraturereview，whichreferredtotheprincipleofCO—in~munoprecipitationtechnologyanditsmeritorflaw．[Keyw0rds]Co—immunoprecipitation；Protein；Interaction；Technology[中图分类号]R392—33[文献标识码]A[文章编号]1672—951X(2007)12—0086—04蛋白质问的相互作用控制着大量的细胞活动事件，如细胞的增殖、分化和死亡。通过蛋白质问相互作用，可改变细胞内蛋白质的动力学特征。如底物结合特性、催化活性；也可产生新的结合位点，改变蛋白质对底物的特异性；还可失活其它蛋白质，调控其它基因表达。因此，只有使蛋白质问相互作用顺利进行，细胞的正常生命活动过程才有保障。由于蛋白质问相互作用具有如此重大的意义，因此其检测方法的研究也备受重视由生化方法。如蛋白质亲和层析(proteinafinitychromatography)、亲和印迹(afinityHoning)、免疫沉淀(immunoprecipitation)及交联(cross—unking)，发展到当今的分子生物学方法，如以基因文库为基础的蛋白探测(pro—teinprobing)、噬菌体显示(phagedisplay)及双杂交系统(two—hybridsystem)等。另外，还发展了可定性和定量检测蛋白质问相互作用的简便又快捷的方法，如表面胞质团共振(Sill'-facepl~smonresonance)等。通过这些方法的联合使用，实验得出的蛋白质问的相互作用的结论显得更为可靠J。1免疫共沉淀基本原理细胞裂解物中加入抗体，这样可与已知抗原形成特异的免疫复合物，若存在与已知抗原相互作用的蛋白质，则免疫复合物中还应包含这种蛋白质，经过洗脱，收集免疫复合物，然后分离该蛋白质，对该蛋白质进行N端氨基酸序列分析，推断出相应的核苷酸序列。将包含活性物质的组织或细胞构建成cDNA文库，以上述核苷酸序列为探针从cDNA文库中分离出cDNA克隆。1．1免疫共沉淀技术的主要步骤1．1．1用磷酸盐缓冲液洗3O块...
