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大鼠血清中NO测定实验过程.docVIP免费

大鼠血清中NO测定实验过程.doc_第1页
大鼠血清NO含量测定【实验目的】测定大鼠血清NO含量【实案原理】NO化学性质活泼,在体内代谢很快转化为NO2和NO3,而NO2又进一步转化为N03-,而NO2-又进一步转化为NO3-,本法利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-,通过显色深浅测定其浓度的高低【实验材料】SD大鼠血清(保存于-20℃)、96孔板、NO试剂盒、酶标仪等【实验过程】1.取出NO试剂盒中的GriessReagentⅠ和Ⅱ,恢复室温2.梯度稀释法稀释标准品:用蒸馏水将1M的NaNO2依次稀释为0,1,2,5,10,20,40,60,100μM的标准品3.取出样品,室温下解冻(每组3个样品,共5组)4.按50ul/孔,在96孔板中加入标准品及样品5.按50ul/孔,在各孔中加入室温GriessReagentⅠ6.按50ul/孔,在各孔中加入室温GriessReagentⅡ7.540nm测定吸光度8.数据记录9.统计学处理:计量资料用均数±标准差(mean±SD)表示,利用SPSS19.0统计软件进行统计分析,实验组间均数比较采用单因素方差分析(onewayanalysisofvariance,ANOVA),并采用LSD法进行两两比较;统计结果P<0.05为差异有统计学意义

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