解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1过敏性哮喘动物模型1.实验原理过敏性哮喘(allergicasthma)的发病机制涉及引起过敏的抗原。抗原一般具备两种特性：一是免疫原性，即能刺激机体产生免疫应答，包括特异性抗体和致敏T细胞；二是抗原性，系指能与抗体或致敏T细胞在体内外发生特异性结合。过敏性哮喘模型的复制需要致敏和激发两个步骤。动物以卵清蛋白(ovalbumin，卵白蛋白)为致敏的抗原(有时并用免疫佐剂如氢氧化铝、灭活百日咳杆菌菌苗等)，经腹腔或皮下注射，刺激机体产生IgE，并结合在肥大细胞等细胞表面，使机体处于致敏状态。一定时间后当动物再次接触到相同抗原后，发生I型速发型过敏反应，呼吸道粘膜肥大细胞等合成并释放多种生物活性物质，引起支气管平滑肌收缩、粘液分泌增多、血管通透性增高和炎症细胞浸润等(激发)，导致哮喘发作。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的建立过敏性哮喘实验动物模型，对其进行相关研究。3.实验材料3.1.主要试剂试剂来源Cat.No.卵清蛋白SigmaA5503乙酰甲胆碱SigmaA2251氢氧化铝凝胶百灵威科技有限公司21645-51-2苏木精-伊红染液碧云天C0105Diff-quick快速染色试剂盒上海翊圣生物科技有限公司40748ES603.2.主要仪器仪器名称来源型号解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn2雾化器江苏鱼跃公司402B无创动物肺功能仪美国Buxco公司TBL450型正置荧光显微镜及成像系统日本奥林巴斯公司CX41-323.3.其他（请具体写明）实验动物要求准备：体重250-300g成年豚鼠，雌雄不限，适应性饲养5～7d。4.实验步骤(1)致敏：腹腔注射10%卵清蛋白生理盐水溶液1.0ml（含卵清蛋白100mg）使豚鼠处于致敏状态。解螺旋http://www.helixlife.cn/(2)激发：注射卵清蛋白后2周，将豚鼠置于密闭有机玻璃箱内，用0.5%-1%卵清蛋白生理盐水溶液超声雾化吸入30s-2min，诱发豚鼠哮喘发作。(3)气道反应性检测：通常在对组胺的气道反应性测定中，随着吸入组胺浓度的增加，模型动物气道内压也逐渐升高；可使用无创动物肺功能仪检测Penh值。设定间歇期为10min，首先测定正常状态下的Penh值作为基线，依次雾化吸入递增浓度的乙酰甲胆碱，并记录Penh的变化，激发质量浓度依次为0，6.25，12.5，25，50，100g/L，记录各质量浓度乙酰甲胆碱激发下的平均Penh值。将每个乙酰甲胆碱激发浓度下的Penh值转换为与正常状态下Penh值的百分比(乙酰甲胆碱激发的Penh值/基础Penh值×100%)作为气道反应性的评价指标。(4)肺组织病理学检测取肺...
