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正常细胞系(共103种,其中人47种,小鼠36种,大鼠11种,非洲绿猴5种,恒河猴3种,绒猴1种)细胞名称动物种别描述组织来源形态培养条件渠道来源293,人胚肾细胞人293细胞是剪切过的人腺病毒5(Ad5)转染的人胚肾细胞形成的永生化细胞。此细胞包含并表达转染的Ad5基因。需在生物安全2级实验室操作。解螺旋http://www.helixlife.cn/肾;以腺病毒5DNA进行转化上皮细胞样细胞,贴壁生长培养条件:完全培养基:DMEM(含2mML-glutamine)+10%胎牛血清。气相:37℃,CO2:5%传代方法:收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换10ml新鲜培养液后继续培养。如果细胞已长满(达80-90%),即可进行传代培养。具体步骤如下:1.弃去培养液,用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热,然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。3.按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分中国科学院昆明细胞库到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传三。注:1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X物镜下。2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。冻存方法:冻存液:90%完全培养液,10%DMSO。现用现配。储存:液氮。293T人胚肾细胞人人胚肾细胞(293细胞株插入SV40T-抗原基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T)。该细胞最初的名字是293tsA1609neo,携带SV40复制序列,被广泛用于逆转录病毒生产、基因表达和蛋白表达。有用户反馈用于腺病毒包装效率高。生物等级:二级。通过本库支原体检测。每个批次均通过本库支原体检测,结果胚肾上皮样细胞人胚肾细胞293T完全培养液配方(100ml)DMEM(Invitrogen,12430054)87mlFBS(Gibco)10mlGlutamax(Invitrogen,35050061)1mlNon-essentialAminoAcids,100×(Invitrogen,11140050)1mlSodiumPyruvate100mMSolution(invitrogen11360070)1ml解螺旋http://www.helixlife.cn/气相:空气,95%...

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