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总黄酮标准曲线.docVIP免费

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2.3含量测定方法研究三氯化铝溶液的配制:称取无水三氯化铝1.34g,于小烧杯中用无水甲醇溶解,然后转移至100mL容量瓶中定容至刻度,备用。醋酸-醋酸钠缓冲溶液:称取2.72g醋酸钠用水溶解,转移至100mL容量瓶中定容至刻度;然后精密量取1.15mL冰醋酸用水稀释,转移至100mL容量瓶中定容至刻度;最后各取70mL冰醋酸溶液和20mL醋酸钠溶液,配制成pH5.2的醋酸-醋酸钠缓冲溶液,备用。2.3.1对照品溶液制备称取干燥至恒重的对照品芦丁0.0109g,其纯度为94.3%,于50mL的容量瓶中用无水甲醇溶解,定容,配制成浓度为0.2056mg/mL对照品溶液[21]。2.3.2供试品溶液的制备称取5g粉碎后的瓦松,加入溶剂量为20倍量的水,用电炉子加热回流提取6h,过滤后将滤液移至烧杯,加入110mL左右的95%的乙醇,静置。待到次日将静置的黄酮提取液抽滤,留滤液备用。2.3.3检测波长的选择将黄酮提取液取10mL用无水甲醇定容至50mL,做成供试品溶液,备用。取对照品溶液(甲醇)、供试品溶液各1mL,置10mL容量瓶中,各加入新配制的三氯化铝溶液2mL,然后再加入pH5.2的醋酸-醋酸钠缓冲溶液1mL,用无水甲醇定容至10mL,摇匀,然后放入40℃水浴锅中水浴10min,待冷却后测其吸光度。图3供试品的最大波长检测以吸光度A为纵坐标,波长为横坐标作图,得到瓦松黄酮供试品在272nm有最大吸收峰,所以选272nm为测定波长。相同方法配制芦丁对照品溶液,检测其波长如下:1吉林化工学院学士学位毕业论文图4标准品的最大波长检测2.3.4标准曲线的绘制精密量取芦丁对照品溶液(0.2056mg/mL)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL分别置于已贴好标签的7个10mL容量瓶中,各加入三氯化铝溶液2mL,醋酸-醋酸钠缓冲溶液1mL,用无水甲醇定容至刻度,摇匀。放入40℃水浴锅中水浴10分钟,以加等量无水甲醇溶液的平行样为空白,用紫外分光光度法于272nm处测其吸光度。数据见表3。表3线性关系考察体积V/mL0.20.40.60.81.01.2浓度C/g/L0.0041120.0082240.0123360.0164480.020560.02467吸光度/A0.1610.2890.4420.5700.7090.854图5标准曲线图以浓度C为横坐标,吸光度值A为纵坐标,绘制标准曲线,进行直线回归,得回归方程:y=33.72x+0.0189(2-1),R2=0.9996。结果表明芦丁在0.004-0.024g/L范围内呈良好的线性关系。见图5。2.3.5精密度实验精密取芦丁对照品溶液1.0mL置10mL容量瓶中,加入三氯化铝溶液2mL,醋酸-醋酸钠缓冲溶液1mL,用无水甲醇定容至刻度,摇匀。放入40℃水浴锅中水浴10分钟,以加等量无水甲醇溶液的平...

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