时间6/23/2014试剂配制糖化醪制备酵母活化6/24/2014小檗碱分离鉴定转接酵母细菌培养发酵罐发酵6/25/2014测糖诱导表达蒸馏测乙醇6/26/2014重组蛋白分离纯化6/27/2014实验2实验3实验4聚丙烯酰胺凝胶电泳6.238:3010:30开紫外线灭菌11:0017:006.248:308:3011:006.238:3010:30开紫外线灭菌11:0017:006.248:308:3011:0021:006.2513:0016:006.268:006.278:30电泳1.YPD配制;2.找枪头,漏斗;之后灭菌接种,培养24h糖化醪制备,总过程需14h,预计19:00开始糖化,过夜小檗碱分离鉴定,按照步骤操作即可配制LB培养基共计700ml,之后分装;准备枪头;之后灭菌取糖化后的醪液过滤,取2L,装到发酵罐中灭菌备用,预计9:30完成上罐,预计2h完成;其中4)1和2,3和4步骤同时进行;实验记录注意1.YPD配制;2.找枪头,漏斗;之后灭菌接种,培养24h糖化醪制备,总过程需14h,预计19:00开始糖化,过夜小檗碱分离鉴定,按照步骤操作即可取糖化后的醪液过滤,取2L,装到发酵罐中灭菌备用,预计9:30完成上罐,预计2h完成;其中4)1和2,3和4步骤同时进行;实验记录注意配制LB培养基共计700ml,之后分装;准备枪头;之后灭菌每半小时测定残糖含量及生物量菌体活化,需12~16h菌体扩培,先培养3h,预计到16:00加入IPTG,培养14~16h细胞破碎及蛋白分离