降落PCR降落PCR（touchdownPCR），一种PCR技术，主要用于PCR的条件的优化。在许多情况下引物的设计使得PCR难以进行，例如特异性不够易错配等。退火温度过高会使PCR效率过低，但退火温度过低则会使非特异扩增过多。实验材料:基因样品仪器、耗材:PCR仪实验步骤：1.反应体积为50μl。2.人CD137胞膜外区基因的PCR扩增体系：CD137-pCDNA3质粒4μl，P1，P2各0.5μmol/L，MgCl22mmol/L，dNTP0.4mmol/L，Taq5U。3.hIgG1Fc片段的PCR扩增体系：含人hIgG1Fc的PGEM-T质粒4μl，P3、P4各0.4μmol/L，MgCl22mmol/L，dNTP0.4mmol/L，Taq5U。4.HBVDNA多聚酶基因的PCR扩增体系：（1）第一轮：HBVDNA模板4μl，P5、P6各0.25μmol/L，MgCl21.5mmol/L，dNTP0.2mmol/L，Taq0.8U.（2）第二轮：取5倍稀释的第一轮PCR产物4μl为模板，P7、P8各0.25μmol/L，MgCl21.5mmol/L，dNTP0.2mmol/L，Taq0.8U。5.分别在各灭菌PCR管加入上述各反应成分，100℃煮沸5min，立即冰浴5min，加入TaqDNA聚合酶，混匀，离心，PCR程序如下：6.取10μlPCR扩增产物，在2%或3%琼脂糖凝胶上电泳，紫外灯下观察扩增产物。注意事项：由于目标是在较早的循环中避免低Tm值配对，在TD—PCR中最好应用热启动技术。设计时，退火温度的范围应跨越15℃左右，从高于估计Tm值至少几度到低于它10℃
