解螺旋·陪伴医生科研成长www.helixlife.cn1大肠杆菌内毒素联合甲泼尼龙建立激素性股骨头坏死兔模型1.实验原理大肠杆菌内毒素可引起机体血管发生超敏反应，如机体同时应用激素可抑制胶原和弹性纤维的合成，引起小动脉断裂或栓塞，最终导致骨坏死发生。解螺旋www.helixlife.cn2.实验目的建立激素性股骨头坏死兔模型3.实验材料3.1主要试剂大肠杆菌内毒素sigma注射用甲泼尼龙琥珀酸钠（甲强龙）比利时辉瑞制药公司注射用青霉素钠华北制药公司注射用兰索拉唑中国四药制药公司3.2主要仪器FA2004电子天平（中国科天化玻璃仪器公司）解螺旋www.helixlife.cn3.3其他健康新西兰大白兔4.实验步骤1.所有兔适应性喂养1周后精确称重；2.注射内毒素前一天开始臀肌注射青霉素（4×104U/d）+兰索拉唑（10mg/d），持续7d；3.常规消毒后实验组兔于耳缘静脉注射内毒素10ug/kg；4.24h后重复给药1次（10ug/kg），注射完毕后立即臀肌注射甲强龙20mg/kg；5.每间隔24h注射甲强龙20mg/kg，共3次；解螺旋www.helixlife.cn解螺旋·陪伴医生科研成长www.helixlife.cn26.指标观察方法：①一般形态学观察：试验动物的精神，体温变化，体质量，尿便，体温，毛发情况，股骨头的外观情况以及动物的死亡情况。②X线观察：行双侧股骨头正位、蛙式位摄片，观察是否有透亮区以及骨质破坏等其他股骨头坏死的表现。解螺旋www.helixlife.cn③MRI观察：行双侧股骨头MRI检查（可采用GE1.5TSIGNAEXITEⅡMEDICALSYSTEMS），用头颅表面线圈。待兔麻醉后仰卧位，分别固定四肢，将股骨头置于线圈中心部分，均选择常规T2加权FRESE序列（TR/TE=2420ms/107ms）和3DFSPGR序列（TR/TE=10.3ms/4.8ms）,层厚（slicethickness）=2.0mm,无间隔，翻转角=15。矩阵（matrixsize）=288×192，视野（FOV）=14cm×14cm。观察股骨头有无信号改变。④组织病理学观察：处死动物后将双侧股骨头取出，剔除肌肉和软组织后，40g/L甲醛缓冲液固定48h，50g/L甲酸-甲醛溶液脱钙3~5d，50g/L硫酸钠处理过夜，体积分数为0.7的乙醇内冲洗3.0~4.0h，常规石蜡切片，苏木精-伊红染色，观察结果。➢一般3周左右建模完成，此时可处死动物，确认是否建模成功。一般可先通过预实验确认建模时间点，再进行正式实验。解螺旋www.helixlife.cn5.应用示例文献1-31.ZhuH,CaiX,LinT,ShiZ,YanS.Low-intensitypulsedultrasoundenhancesbonerepairinarabbitmodelofsteroid-associatedosteonecrosis.ClinOrthopRelatRes2015;473(5):1830-9.2.DingH,G...
