亚源制帽网站建设巴傲得生物——专业抗体解决方案重组质粒报告人：王期基因克隆genecloning基因克隆的基本程序：分—切—接—转—筛PCR酶切连接转化、转染抗性或标记筛选目的基因DNA片段的获得外源DNA分子与载体DNA分子的体外重组重组DNA分子转移到适当的受体菌或细胞重组DNA分子克隆的筛选和鉴定目的基因或其表达产物的纯化和鉴定基因克隆技术的特点：1、可在体外人工的，有目的的，根据需要进行基因的重组、表达、测序、诱变、修复；2、方法简便、快速、准确、特异，能保证研究与开发的需要。重组质粒（过表达、干扰、荧光报告质粒等）用于细胞信号通路变化、蛋白功能、原核真核蛋白表达等研究质粒(Plasmid)质粒是独立于宿主细胞（如细菌）染色体之外的可进行复制和遗传的单位--双链闭合环状超螺旋DNA分子，大小从1K-200Kb。重组质粒的构建：目的DNA的PCR扩增DNA片段和载体的酶切片段DNA与载体的连接载体：Plasimd(primary)工具酶：聚合酶限制性内切酶连接酶常见的基因工程载体载体：用于携带重组DNA，并能够使外源DNA一起复制与表达的运载工具。根据来源:plasmid;phage;viral;BAC;YAC根据用途分:克隆载体;原核表达载体;真核表达载体根据与宿主的关系分:整合型载体;非整合型载体质粒构建的外包▲TA克隆▲亚克隆▲定点突变▲质粒DNA制备服务优势1.几十种人源和小鼠的总cDNA2.相对齐全的载体库存系统3.时间4.新客户可以免费赠送空载质粒5.超人性化的售前和售后技术服务质粒共享库PPL▲资源共享、整合、公益的平台▲为科研工作者节省实验经费▲体现科研工作者对科研事业，生物医药领域的贡献☆细胞信号通路过表达质粒(野生型与突变型）如：pcDNA3.1-flag-P53(WT)；pCMV-HA-hsp70；pCMV-flag-Hsp27S78/82A；pcDNA3.1-Flag-TRAF6ΔN☆信号通路RNAi质粒（shRNA)如：pRNA-U6-hsp70；Psuper-GSTPi质粒资源分类☆信号通路相关报告基因质粒如：pSTAT3-luc；pNF-κB-luc；pcDNA3-flag-JNK2-GFP；☆原核真核相关表达载体、表达菌及重组质粒如：pET15b,BL21(DE3)-codonplus-RIPLpFastBac™1-hEGFR（1-621aa）质粒图谱解读Vectorbackbone（空载）Recombinantplasmid(重组质粒)质粒库质量控制1.一质粒一说明书(重在测序报告）2.不同类型质粒分类3.定期进行活化与冻存4.绩效◆说明书的问题----Q我◆价格问题----购买or交换◆质粒名称的问题----认清标签、基因名等◆库中没有的质粒----Q我或建议客户构建◆信息不全的质粒----建议客户先试用后付款◆提供量及形式----2微克，液体，要菌液的客户可以答应◆客户验证不出或不对----答应换正确的或退钱销售过程的问题CaseStudy案例欣赏更多内容请访问www.biogot.com
