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如何让支原体远离你的细胞.doc_第1页
如何让支原体远离你的细胞据粗略估计,大约三分之一的细胞培养物都感染了支原体。这些小东西神不知鬼不觉,侵入你的细胞。由于它们体积小,生长缓慢,所以难以察觉。但是,它们的存在又确实改变了细胞的代谢过程,继而干扰你的实验结果,或造成无法解释的差异。更糟的是,拯救被感染的细胞几乎是不可能的任务。因此,就支原体污染而言预防是第一要务。下面介绍了一些简单的预防措施,也许对你有用。细胞来源是关键支原体污染的最常见原因之一是引入的培养物已经被感染。一旦进入实验室,这些小东西会蔓延到每个角落,让你崩溃。要避免这种情况,最简单的办法就是不从其他实验室要细胞,而从供应商或菌种保藏中心(ATCC或ECACC)购买,这些细胞经过严格检测,确保不含有支原体。如果购买有难度,或基于其他原因,不得不使用其他实验室的细胞,那么也要保持警惕,在单独的培养箱中隔离,同时进行支原体的检测。市场上有多家公司提供支原体检测试剂盒,你可自行选择。定期检测很重要即使实验室没有新来的细胞,支原体也可能通过操作人员传递到现有的培养物。当然,操作人员并不知道。支原体污染的另一条路线是通过你的细胞培养试剂。培养基、酶这些常用试剂,也有可能被支原体污染。尽管无法完全避免人或试剂的污染,但常规检测也能避免情况恶化。也许,当支原体初次感染时,我们未必能检测到,但尽早发现,就能防止这种微生物的传播,避免大的损失。支原体检测有很多种。直接培养方法虽然准确率高,但需要三到四周的时间。因此,我们在常规检测中使用间接检测方法已足够,若发现阳性,则后续可采用较为繁琐的直接检测。常见的间接检测方法有基于酶活性的荧光和生化分析、PCR分析、免疫分析等。无菌操作要做好支原体污染的另一个主要源头是无菌操作不佳。尽管良好的操作可能是最简单的预防措施,但说起来容易,做起来难。每个人都会犯错,特别是在重复劳动时。因此,实验室应不定期开展培训和监督,以便让每个人都充分认识到支原体的破坏性。许多实验室目前仍使用抗生素,但细胞培养人员逐渐认识到这是不负责任的,因为它带来了耐药微生物的问题。相反,最好依赖自身的无菌操作来预防支原体,而只有在怀疑或确认感染的时候才使用抗生素。保藏细胞防万一最后,通过低温保藏储备一些细胞,以防支原体大面积来袭。如果支原体有抬头的迹象,或常规检测呈阳性结果,那么最可靠的补救措施是扔掉所有培养物,清洁培养箱和超净台,一切从头开始。当然,你得确...

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