29生命科学仪器2009第8卷/2月刊1前言总黄酮是很多保健食品中的重要功效成份,能促进胰岛素的亲和力,在降压、降脂、降血糖方面有显著效果,同时还具有增强毛细血管通透性等作用。因此,测定其含量对于保健食品的品质和功效具有重要的意义。但目前国内还没有保健食品中总黄酮测定方法的国家标准。国内外对保健食品中总黄酮的测定,考虑到方法的简便、快捷以及平行性,多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。但是,总黄酮这种天然植物的组分非常复杂,分光光度法在实测过程中会产生各种干扰,影响结果的准确性,本方法有针对性地对此开展了研究,进行了创新并取得了较好的结果,建立了一个高效、准确的测定方法。目前总黄酮的分析方法国外报道的有溶剂抽提法、聚酰胺薄层分析法等。但是,柱法操作复杂、时间长,难以避免实测过程中会产生各种干扰。因此比较而言,本方法立足于用常规的化学及物理检测方法,采用了超声波提取、聚酰胺吸附法经过改进系统,试验得到了快速、简易、良好的效果,在实际测定、应用中,具有更大的意义。2检测方法2.1试剂与仪器2.1.1试剂与材料a)无水甲醇、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、三氯甲烷,均为分析纯,以下用水除特殊说明外,均为GB/T6682-2008中规定的三级水。b)聚酰胺粉:过80目~100目筛。c)5%亚硝酸钠溶液:称取5.00g亚硝酸钠,加水至100ml,溶解混匀,当天配制。分光光度法测定保健食品中总黄酮孔鲁裔(国家农业标准化监测与研究中心黑龙江)d)1mol/L氢氧化钠溶液:称取4.00g氢氧化钠,加水至100ml,溶解混匀。e)10%硝酸铝溶液:称取10.00g硝酸铝,加水至100ml,溶解混匀。f)30%乙醇溶液:吸取30.0ml无水乙醇,加水至100ml,溶解混匀。g)芦丁标准对照品:99.5%h)芦丁标准溶液:精确称取经105℃干燥至恒重并按其纯度折算为100%质量的芦丁标准对照品0.0150g,加无水甲醇溶解并定容至100ml,此溶液浓度为150μg/ml,0℃~4℃密封保存,保存期为两个月。2.1.2仪器设备a)天平:感量0.1g和0.0001g。b)分光光度计。c)超声波发生器。d)恒温水浴锅。e)涡旋混合器。f)抽滤装置:真空泵、抽滤瓶、布氏漏斗、定量滤纸。g)层析柱:20cm以上内径为1cm的玻璃管。h)蒸发皿:规格100ml。i)具塞比色管:规格10ml和50ml。2.2操作步骤2.2.1提取2.2.1.1固体样品取有代表性样品,1g~5g(精确至0.01g)于50ml具塞比色管中,加入30ml无水乙醇,涡旋混匀3min。超声提取30min,抽滤,用无水乙醇淋洗比色...