www.eshuba.comE书吧目录序前言绪论1一、能用作纯化依据的蛋白质性质1二、分子相互作用的类型及其影响因素5三、分离方法的类型6参考文献7如何使用本指南9第1单元钙调蛋白的纯化DanielR.Marshak11实验1活性测定：钙调蛋白组分的活性测定19实验2组织提取物的制备24实验3粗分级分离32实验4离子交换层析39实验5疏水作用层析46实验6钙调蛋白的鉴定：收率的计算51实验7钙调蛋白的鉴定：电泳53、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳53二、无法垢剂的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳54三、尿素梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与折叠分析56实验8蛋白质的裂解消化59一、钙调蛋白的溴化氰裂解63二、钙调蛋白的胰蛋白酶消化64实验9反相高效液相色谱66实验10钙调蛋白的物理分析70一、紫外吸收光谱70二、蛋白质和肽的质谱71实验11钙调蛋白的化学分析75一、氨基酸分析75二、序列分析76试剂的配制82第2单元Hela细胞转录因子AP-1的纯化JamesT.Kadonaga89实验1Hela细胞核提取物的制备91实验2SephacryS-300HR凝胶过滤层析94一、如何装填凝胶过滤性96二、Hela细胞核提取物的SephacryS-300HR柱层析98实验3序列特异性DNA亲和层析101一、用制备凝胶电泳纯化寡核苷酸105二、DNA亲和介质的制备107三、亲和层析中非特异性竞争DNA的正确使用112四、亲和层析的操作113实验4DNA酶I足迹分析117一、DNA酶I足迹探针的制备118二、DNA酶I足迹分析122实验5凝胶迁移变动分析126实验6肝素-SepharoseCL-2B的制备129试剂的配制131参考文献138第3单元大肠杆菌中过表达重组蛋白的纯化RichardR.Burgess和MarkW.Knuth141实验1大肠杆菌细胞的破碎和包涵体的配制144实验2包涵体沉淀的溶解、重折叠和离子交换层析148实验3可溶性提取物（核心RNA聚合酶-复合物）的聚乙烯亚胺沉淀和免疫亲和层152析一、PEI沉淀法分级分离可溶性提取物153二、免疫亲和层析154实验4定量测定与制备小结158一、蛋白质的定量测定158二、定量SDS凝胶染色与扫描159三、定量蛋白质斑点印迹160四、酶测定法163五、纯化记录表164六、蛋白质纯化总结表与主要组分的总电泳照片165实验5蛋白质的鉴定167一、纯蛋白质的紫外光谱——A280mm/A260nm167二、消光系数的测定（Scopes法）167三、过载染色SDS凝胶扫描法估测纯度169四、由非变性凝胶电泳迁移率法评估均一性169方案补充实验：从过表达细菌提纯172一、快速蛋白质斑点印迹试验172二、是可溶的还是不溶的？173三、溶解包涵体沉淀需多少N-十二烷基肌氨酸钠？173四、沉淀和RNA聚合酶需多少聚乙烯亚...
