解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn1肿瘤细胞耐药性检测1.实验原理肿瘤耐药是临床肿瘤化疗中的常见现象，是困扰临床的重要难题和亟待解决的困境。耐药细胞株是研究肿瘤耐药的常用体外模型。目前对细胞耐药能力检测的最常用方法是检测细胞的IC50(halfmaximalinhibitoryconcentration)。IC50，是指某一药物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质，比如酶，细胞受体或是微生物)的50%量时的浓度。在凋亡方面，可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%，该浓度称为50%抑制浓度，即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度，IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低，即细胞对药物的耐受程度越低。通过比较细胞样本的IC50（可与敏感细胞或者亲本细胞比，也可与设计好的对照组比），即可评价该样本对药物的耐受能力。解螺旋http://www.helixlife.cn/2.实验目的检测细胞样本的IC503.实验材料3.1.主要试剂化疗药、目标细胞（可设置不同的分组）、培养基、胰酶等3.2.主要仪器超净台、二氧化碳培养箱、离心机、显微镜、酶标仪解螺旋陪伴医生科研成长http://www.helixlife.cn24.实验步骤1.取对数生长期的细胞，接种于96孔板内，待细胞贴壁后，换上带有不同梯度浓度药物的培养基（如0.1，0.25，0.5，1，2，5，10μM。若是浓度不确定，可先查阅文献，获得一个大致的范围，在这个范围里设置梯度，第一轮，可以采取大倍数梯度稀释，如10倍，第二轮，小幅度梯度，如2倍倍比稀释或等差比例稀释。2.于不同的时间点检测细胞增殖情况。解螺旋http://www.helixlife.cn/3.计算细胞的IC50。5.应用实例文献1,21.PuY,ZhaoF,WangH,etal.MiR-34a-5ppromotesthemulti-drugresistanceofosteosarcomabytargetingtheCD117gene.Oncotarget2016;7(19):28420-34.2.ZhaoZ,LiJ,JiangY,XuW,LiX,JingW.CLDN1IncreasesDrugResistanceofNon-SmallCellLungCancerbyActivatingAutophagyviaUp-RegulationofULK1Phosphorylation.MedSciMonit2017;23:2906-16.
