大鼠主动脉平滑肌细胞培养正常的动脉壁由三层构成，分别为内膜、中膜和外膜。其中，中膜主要是平滑肌细胞，可以使血管收缩和舒张。平滑肌细胞的舒缩可控制管径的大小，调节器官的血流量，保持血压稳定。血管平滑肌细胞是许多重大动脉疾病的细胞底物。血管平滑肌细胞的不断增长是损伤性血管病变形成、动脉疾病发展的重要原因。体外培养血管平滑肌细胞是研究在血管病变发生过程中细胞及分子改变的基础。此外平滑肌细胞具有产生结缔组织和基质的功能，因此动脉平滑肌细胞是研究动脉粥样硬化、血管成形术后再狭窄以及高血压等疾病发病机制和防治工作的重要对象。研究表明，大、中动脉的内膜和中膜内没有成纤维细胞，而平滑肌细胞大部分存在于中膜，因此主动脉中膜可作为获取平滑肌细胞的最佳来源。胸主动脉分支较少，而腹主动脉较多，尽量去除分支利于平铺于培养皿中。本视频以大鼠主动脉为材料，介绍以组织块贴壁法培养平滑肌细胞的技术。一、实验前准备实验开始前，将眼科剪刀、眼科镊子、培养皿，15ml离心管、移液管、移液枪、枪头等放入无菌超净工作台，以紫外线照射30min。选取SPF级，体重100~150g左右的SD大鼠，断颈处死。将大鼠置于体积分数为75%的乙醇中浸泡5min。工作台紫外消毒后，采用通风机通风3min。以75%酒精擦拭操作台和双手。无菌条件下，准备好大剪刀、止血钳、眼科剪刀、眼科镊子、干净培养皿。将大鼠仰卧在超净台内的干净培养皿上。二、主动脉采集剪刀剪开腹部皮肤，暴露腹腔，将腹腔内脏拨到一侧，然后以眼科镊子轻轻剥离连接内脏的结缔组织，暴露主动脉，注意尽量采用镊子的钝端，以免戳破或弄断动脉。也可采用无菌纱布轻轻擦拭动脉外膜，以清晰暴露视野，去掉部分外膜。为了尽量获得取材标本，需从腹主动脉向上直至分离至心脏连接处，分离动脉时，注意将动脉与之相连的下腔静脉分离，并仔细剪断两端的细小分支，剪断两端，将动脉轻柔置于无菌培养皿中。样品漂洗及剪切用无菌PBS浸泡清洗剪取的主动脉血管。眼科镊子钝端轻轻剥去外膜附着的结缔组织，并挤出血细胞，以手术刀轻轻刮除外膜，勿刮破血管，并仔细剪掉残留的细小分支。剥除血管外膜和内膜时，动作轻柔，避免用力牵扯，使细胞受伤，活力下降，导致细胞生长缓慢或不生长。以眼科剪刀修剪血管外的细小分支，纵向剪开动脉血管，显露血管腔和内膜，以镊子钝端抹平血管壁，再次采用手术刀轻轻刮除血管内膜，注意勿刮破血管壁。剥离了外膜和内膜后，此时可见血管中膜为白色，有...
