1细胞培养基本技术ustcwhm@ustc.edu.cnhttp://ioi.ustc.edu.cn→在授课程→细胞生物学原理与技术→PPT下载2无菌操作技术体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室，若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而,为在一切操作中最大可能地保证无菌，每一项工作都必须做到有条不紊和完全可靠。3消毒(disinfection)和消毒剂(disinfectant)灭菌(sterilization)防腐(antisepsis)和防腐剂抑菌(bacteriostasis)和抑菌剂(bacteriostatic)无菌(asepsis)无菌技术/无菌操作(antiseptictechnique)TermstorememberTermstoremember:4无菌操作技术1.工作环境及表面的处理2.细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理3.实验者的操作技术4.培养液的处理5无菌技术概念无菌技术无菌区非无菌区相对无菌区无菌物品污染物品是指在医疗、护理操是指在医疗、护理操作过程中，防止一切作过程中，防止一切微生物侵入人体和防微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区止无菌物品、无菌区域被污染的技术。域被污染的技术。是指经过灭菌处理是指经过灭菌处理且未被污染的区域。且未被污染的区域。是指未经过灭菌处理是指未经过灭菌处理，或虽经过灭菌处理，或虽经过灭菌处理但又被污染的区域。但又被污染的区域。是指无菌物品自无菌是指无菌物品自无菌容器内一经取出，就容器内一经取出，就认为是相对无菌，不认为是相对无菌，不可再放回。可再放回。无菌区边缘向内无菌区边缘向内3cm3cm为相对无菌区。为相对无菌区。是指经过物理或化学是指经过物理或化学方法灭菌后保持无菌方法灭菌后保持无菌状态的物品。状态的物品。是指未经处理或消毒是指未经处理或消毒灭菌后又被碰脏的物灭菌后又被碰脏的物品。品。6【培养前准备】在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后，因物品不全往返拿取而增加污染机会。1、实验时间与地点2、实验目的3、实验材料4、实验方法5、实验结果6、结果分析与讨论7【操作野消毒】无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用)，紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多...
