细胞侵袭对于进行细胞侵袭的研究者来说，传统试验方法具有染色及计数会占用实验者大量的精力，且数据单一，实验通量及重复性低等特点。本实验采用罗氏全新的方法来监测细胞侵袭，将CIM-Plate16结合RTCADPAnalyzer使用，这个独特的装置可在无标记条件下对细胞侵袭进行实时监控。CIM-Plate16由上室和下室组成，两者之间由微孔膜分隔开。金制串珠状微电极紧密结合，附着于PET膜下层，并覆盖80%表面积。趋化剂添加到下室，上室内添加研究的细胞和选择性添加细胞外基质胶。当细胞设法穿过膜，进入下室，黏附到电极上，系统可测量电阻抗变化。随着微孔膜下侧细胞数目的增多，电阻抗增大，表现为细胞指数的变化，并被RTCADPAnalyzer记录下来。接下来，我们介绍整个细胞侵袭实验的流程一、编辑实验程序打开RTCAsoftware，可看到三个用户权限ID，本次实验我们用administrator登录，密码为小写的administrator。userone和usertwo登录时无需密码。点击确认后，可根据实验需求进行选择适当的cradle。启动RTCADP软件后，如果软件仍停留在上一个实验界面，可以在file中点击release，开启一个新的实验。experimentnote页面下，填写本次实验的相关信息，包括实验名称，所使用细胞板的IDnumber信息等，备注栏内填写一些简单的实验设计。到Layout页面下，输入本次实验的设置，选中A1-H1，填写细胞系名称，细胞类型是HT-1080，每孔20000个细胞，点击apply，设置信息完成。选择A1-F1，本实验将从高到低浓度Matrigel进行包被，最高浓度为10%，以2倍稀释度稀释，两个重复。选择G1和H1，填写serumFreeMedium作为空白对照,保存后，将A1-H1信息复制到第二排。此时可见16孔板设置完成的实验信息。转到schedule页面，点击增加一步按钮。第一步是用于检测背景值的实验步骤，step-status显示为IDLE，表示未完成，请勿更改背景检测步骤参数。点击增加步骤按钮，建立第二个实验步骤，这里根据检测时间的长短，可以自行设计实验的检测次数及间隔时间。二、准备实验以及包被从冰箱中取出Assemblingtool以及CIMplate上板。拆开上板，可见板上和盖子上均有蓝点标记，将蓝点对蓝点，把板放在Assemblingtool上。由于CIMplate板的电极是铺在孔膜的背部，所以上板不能直接接触桌面，安装时需特别注意。首先进行Matrigel包被，每孔内加入50µlmatrigel，每做完一个梯度，即4个孔后，马上从孔内轻轻吸出30µlMatrigel。如果出现气泡，用枪头小心剔除。空白对照的四个孔同样加入50µl的无血清...
